TRIB2通过βTrCP调节TFRC泛素化并抑制肝癌细胞铁死亡敏感性

目的:本部分旨在探究TRIB2调节铁稳态的机制,明确TRIB2调控肝癌细胞铁死亡敏感性的作用,为基于TRIB2的肝癌防治提供理论基础。方法:采用流式细胞术检测细胞死亡与ROS水平。采用基于ATP的方法检测细胞增殖能力。采用基于EImpact biomechanicsLISA的方法检测花生四烯酸与肾上NSC125066供应商腺酸水平。采用免疫共沉淀实验检测底物的泛素化。结果:TRIB2的敲除增加了肝癌细胞中不稳定铁并提高细胞对铁死亡的敏感性,TRIB2的过表达则与之相反。进一步研究发现敲除TFRC可抑制TRIB2对不稳定铁的作用,证明TFRC是TRIB2调节细胞内铁稳态的靶点。免疫共沉淀实验证明βTr CP可作为TFRC的E3s调控其泛素化水平。敲除βTr CP可逆转TRIB2对不稳定铁和铁死亡相关ROS的抑制作用。结论:本研究阐明了TRIB2通过E3s βTr CP促进TFRCDibutyryl-cAMP分子式泛素化并降低不稳定铁,最终降低肝癌细胞铁死亡敏感性的作用。