DUB信号通路

微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是一种重要的食源性人兽共患寄生虫,由其引起的隐孢子虫病能够导致人和动物产生腹痛、腹泻等症状。在发展中国家,C.parvum和C.hominis是导致婴幼GNE-140儿中度乃至重度腹泻的主要病原体之一。糖基化是生物体中普遍存在的蛋白质修饰之一,包括隐孢子虫和其他顶复门,大约50%的蛋白质可能被糖基化。在隐孢子虫中,N-和O-连接的糖基化都大大简化了,并且与哺乳动物不同。微小隐孢子虫具有一种碳水化合物结合蛋白malectin(Cp Mal),编码基因为cgd6＿110。该蛋白与Glc(2)N-聚糖结合,存在于动物和一些囊泡虫(Alveolates)中,但不存在于除隐孢子虫外的其他顶复门寄生虫中。目前对(Cp Mal)的基本分子和生化特性尚无相关报道。本研究利用制备的多克隆抗体,使用免疫印迹和免疫荧光法检测天然Cp Taurine供应商Mal的定位和存在形式。制备了重组Cp Mal和人源Malectin(Hs Mal),并比较了它们与Amylose以及宿主细胞表面的结合活性。用Far-western blot以及Farimmunofluorescence方法检测寄生虫中Cp Mal的潜在结合蛋白。研究结果表明Cp Mal是以二聚体的形式广泛分布于子孢子体内的,但在胞核前后高度集中。与Hs Mal相比,Cp Mal结合直链淀粉的亲和力显著降低,但对HCT-8细胞的结合活性显著提高。重组Cp Mal识别了3条高分子量蛋白质带,并标记了对应于晶状体的子孢子后端,从而表明其潜在的配体在寄生虫中的存在。综上所述,CAutoimmune haemolytic anaemiap Mal在分子和生化性质上明显不同于Hs Mal。因此,进一步研究其生化和生物学作用是十分有必要的。

鸡红细胞被广泛应用于各种诊断试验，多数使用的是新鲜的鸡红细胞。新鲜的鸡红细胞需现用现采，一般在4℃条件下最长保存5 d，且易破裂，不便于运输，既不方便取得还比较耗时，因此在现地工作中不易推广使用。为了克服新鲜鸡红细胞保存期短、制备麻烦的缺点，很多保存鸡红细的方法被研究与应用。本研究应用醛化、冻干两种保存方法保存的鸡红细胞与新鲜鸡红细胞进行了新城疫病毒、禽流感H9病毒的血凝-血凝抑制比较试验。结果表明：在血凝试验中，醛化鸡红细胞试验组较新鲜selleck Belumosudil鸡红细胞组低1～2个效价，冻干红细胞试验组较新鲜红细胞组低2～3个效价Borrelia burgdorferi infection；在血凝抑制试验中，醛化红细胞试验组较新鲜红细胞组高1RAD001临床试验～2个效价，冻干红细胞试验组较新鲜红细胞组高2个效价。说明现地可以使用2%冻干鸡红细胞来代替1%新鲜鸡红细胞进行血凝-血凝抑制试验。

目的:探究硼替佐米对人甲状腺癌(TC)细胞凋亡、侵袭的影响及可能的作用机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞，MTT法筛选硼替佐米的实验浓度及时间;取指数增长期的甲状腺癌B-CPAP细胞，分为Adavosertib浓度对照组、AICAR组(AMPK激活剂2mmoL/L)、硼替佐米(50nmoL/L)组、硼替佐米+Compound C组(硼替佐米50nmoL/L+AMPK抑制剂Compound C 5μmoL/L);流式细胞仪检测各组B-CPAP细胞凋亡率; Transwell实验检测细胞侵袭能力; Western Blot检测细胞凋亡、侵袭以及AMPK/m TOR/4EBP1通路相关蛋白的表达[BLGX818核磁细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspases-3)、E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、β-连接素(β-catenin)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)及其磷酸化蛋白]。结果:不同浓度的硼替佐米能不同程度的抑制B-CPAP细胞的生长，与对照组相比，AICAR组和硼替佐米组B-CPAP细胞凋亡率、Caspases-3、E-cadherin、β-catesurface biomarkernin的表达、p-AMPK/AMPK的比值显著升高(P<0.05)，进入Transwell小室下层的数量、Bcl-2的表达、p-m TOR/m TOR、p-4EBP1/4EBP1的比值显著降低(P<0.05)，且AICAR组与硼替佐米组之间无明显统计学差异(P>0.05);使用AMPK抑制剂Compound C可升高p-m TOR/m TOR、p-4EBP1/4EBP1的比值，明显减弱硼替佐米对甲状腺癌BCPAP细胞侵袭的抑制作用及促凋亡作用。结论:硼替佐米可抑制人甲状腺癌细胞增殖、侵袭，并诱导细胞凋亡，其作用机制可能与激活AMPK，抑制m TOR和4EBP1的活化有关。

目的 探讨CXCR2在小鼠种植体周围炎发病获悉更多机制中的作用。方法 将小鼠的右上颌第一磨牙拔除后即刻植入种植体，愈合4周达骨结合后，随机分为对照组、模型组和治疗组。通过结扎浸有热RP56976临床试验灭活牙龈卟啉单胞菌的丝线诱导种植体周围炎，治疗组腹腔注射CXCR2抑制剂SB225002，对照组及模型组注射生理盐水。连续注射14 d后，肉眼观察牙龈大体形态；应用Micro-CT检测种植体周围骨丧失情况；HE染色、免疫荧光染色分别检测牙龈总炎症细胞、中性粒细胞浸润情况；TRAP染色观察牙槽嵴顶破骨细胞数量差异；RT-PCR检测Cxcl1 （人白细胞介素-8小鼠功能同源物）及骨吸收相关因子Rankl mRNA表达情况。结果 与对照组相比，模型组的骨吸收程度、中性粒细胞stratified medicine及破骨细胞数量、Cxcl1及Rankl mRNA表达水平显著升高。治疗组的骨吸收程度、中性粒细胞及破骨细胞数量、Cxcl1及Rankl mRNA表达水平较模型组显著降低。结论 CXCR2在小鼠种植体周围炎中参与中性粒细胞募集和破骨细胞生成，可能是种植体周围炎潜在的治疗靶点。

为探究磺胺甲恶唑(sulfamethoxazole,SMX)胁迫下人工湿地植物与根际微生物的响应机制，对不同浓度SMX在5种植物GW4869核磁与根际微生物联合修复中的去除效率进行表征；依据SMX的去除效率，对唐菖蒲和风车草的根系活力、活性氧与抗氧化系统进行研究，同步分析其根际微生biological warfare物群落在SMX和温度胁迫下的响应特征。结果表明：5种人工湿地植物与根际微生物联合修复中，唐菖蒲、风车草对SMX的去除率较高，平selleckchem Bafilomycin A1均值分别为40.38%、44.70%。当SMX浓度超过30 mg/L时，与0 mg/L时相比较，唐菖蒲、风车草的根系活力受到抑制，分别下降了69.77%、67.26%；随着SMX浓度的升高，唐菖蒲和风车草的活性氧含量分别增加了69.08%、72.67%，抗氧化酶活性降低了19.32%、24.83%；与常温条件（20～25℃）相比，低温条件下（4～12℃）下唐菖蒲、风车草的活性氧含量分别增加了2.26%、1.98%，抗氧化酶活性降低了47.72%、44.42%。高通量测序技术对根际微生物群落的测定结果表明，高浓度SMX对植物根际微生物群落多样性与物种丰富度有抑制作用，利用PICRUSt功能预测软件对微生物群落功能预测发现，以氨基酸和碳水化合物代谢功能为主的微生物细菌相对丰度较高。

【目的】制备鼠伤寒沙门菌高免血清并纯化抗体，构建免疫磁珠，进行吸附效果评价，为建立鼠伤寒沙门菌快速检测方法奠定基础。【方法】利用试验兔制备高免血清，检测效价后纯化提取IgG抗体，纯化后的抗体采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺方法与四氧化三铁磁性纳米颗粒偶联，制备出鼠伤寒沙门菌免疫磁珠。利用抗原抗体反应原理，通过免疫磁珠对样品中的鼠伤寒沙门菌进行富集分离，将鼠伤寒购买LY294002沙门菌捕获到磁珠表面，达到检测鼠伤寒沙门菌的目的。【结果】制备出的血清效价达1∶51 200,纯化后的抗体特异性强，仅与鼠伤寒沙门菌有凝集反应，与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌均无凝集反应；制备的免疫磁珠能够富集奶样样品、肉样样品与蛋黄样品中的鼠伤寒沙门菌，灵购买Imidazole ketone erastin敏度为10~(1)CFU/mL。【结论】该研究制备的鼠伤寒沙门菌免疫磁珠non-medicine therapy，能够有效富集各种样品基质中的鼠伤寒沙门菌，有望用于鼠伤寒沙门菌快速检测方法的建立。

以程序性死亡配体1/程序性死亡受体1 (programmed cell death ligand 1/programmed cell death protein 1， PD-L1/PD-1) 免疫检查点阻断治疗为代表的肿瘤免疫疗法在临床上更多取得了令人鼓舞的治疗效果。小分子肿瘤免疫治疗药物与免疫检查点抗体药物的联用， 为肿瘤治疗提供了新策略。因此， 研发能阻断PD-L1/PD-1免疫检查点相互作用的小分子药物是下一代肿瘤免疫疗法的新方向。本研究对丹酚酸B (salvianolic acid B， SAB) 下调肿瘤细胞中PD-L1表达发挥抗肿瘤作用及机制进行了研究。利用Western blot、流式细胞术、PD-1/PD-L1相互作用分析SAB对结肠癌细胞RKO和前列腺癌细胞PC3细胞内和膜表面PD-L1蛋白表达水平的影响; 荧光定量PCR检测SAB对PD-L1 mRNA的影响; 细胞阻抗法和结晶紫法检测SAB对人类外周血单核细胞 (peripheral blood mononuclear cell，Mirdametinib使用方法 PBMC) 杀伤肿瘤细胞的效果; 表面等离子共振技术分析SAB与泛素羧基末端水解酶2 (ubiquitin carboxyl-termBiologic therapiesinal hydrolase 2， USP2) 的直接相互作用; MC38荷瘤小鼠 (所有动物实验均遵循中国医学科学院医药生物技术研究所伦理委员会的规定) 检测SAB的体内抑瘤效果。结果表明， SAB能分别以浓度依赖性和时间依赖性方式下调RKO、PC3细胞中以及细胞膜表面PD-L1的水平， 这与SAB抑制肿瘤细胞中去泛素化酶USP2的活性有关。机制研究发现， SAB可与USP2发生直接相互作用并抑制其去泛素化酶活性， 从而促进PD-L1发生泛素-蛋白酶体途径降解。此外， SAB可促进共培养的PBMC对RKO细胞的杀伤作用。小鼠荷瘤实验证实， SAB可显著抑制C57BL/6小鼠中MC38移植瘤的生长。20 mg·kg~(-1) SAB处理荷瘤小鼠后， 可使瘤体积减少63.2%。以上结果说明， SAB通过直接结合USP2并抑制其活性， 促进PD-L1发生泛素-蛋白酶体途径降解， 从而发挥抗肿瘤作用。本研究为将SAB研发成靶向USP2-PD-L1轴的小分子肿瘤免疫治疗药物奠定了基础。

为探寻一种更加合理高效的猪支原体肺炎（MPS）免疫方式，本研究使用MPS弱毒疫苗进行基础免疫后14天再使用灭活疫苗进行加强免疫，通过人工Social cognitive remediation感染猪肺炎支原体来评价其免疫效果。同时将这种免疫程序在规模化猪场进行实际应用，通过计算一定时期内的日增重来评价其免疫效果。结果显示：联合免疫在保证黏膜免疫效果的同时并未降低体液免疫水平。更为重要的是，联合免selleck化学疫不但具备较高攻毒保护率，而且在攻毒后剖杀时其肺泡灌洗液中抗原含量远低于其它免疫方式。这些结果说明联合免疫可以产生较好的免疫协同作用，从而提高了机体的综合免疫保护能力。田间试验结果发现，联合免疫组猪群从21日龄至80日龄平均增重27.31 kg，比活疫苗免疫组猪群多增重3.02 kg，selleck Erastin比灭活疫苗免疫组猪群多增重3.73 kg；其平均日增重可达0.46 kg/天。本研究为防治猪支原体肺炎提供了新的思路。

目的 探讨假包膜征与乙肝肝硬化背景下肝细胞肝癌的大小、AFP及病理分化程度的相关性。方法 回顾性分析103例乙肝肝硬化伴发肝癌患者的临床及影像学资料，根据磁共振平扫及强化扫描的影像特征将所有病例分为包膜组和无包膜组，比较2组间肿瘤直径、甲胎蛋白(AFP)及病miRNA biogenesis理分化差异。https://www.selleck.cn/products/kd025-(slx-2119).html结果 共检出79枚小肝癌，其中高分化14枚、中分化65枚；显示有假包膜征小肝癌32枚(包膜完整18枚，包膜不完整14枚),无包膜小肝癌47枚。通过组间比较包膜组病灶直径为1.85(1.50,2.30)cm,无包膜组病灶直径为1.50(1.10,1.90)cm, 2组总体病灶直径分布存在统计差异(z=2.53,P=0.001);包膜组与无包膜组AFP及病理分化程度总体分布差异无统计学(P>0.05)。结论 磁共振增强扫描门脉期及平衡期对肝癌假包膜显示率较高，INCB28060采购肿瘤大小与癌灶假包膜存在相关性。

为探究鸭粪施用对土壤环境质量以及梨品质的影响，促进梨树施肥中鸭粪肥部分替代化肥的科学施用，在等氮量替代条件下，以当地习惯施肥为对照（CK），设置30%(DM1)、40%(DM2)、50%(DM3)和60%(DM4)共5种鸭粪替代化肥处理，并于4月和7月对25a树龄的砀山酥梨进行两次施肥；于9月采集不同处理组的土壤和梨样品，检测分析土壤环境质量Captisol（土壤养分、重金属、抗生素）以及梨品质指标（可溶性固形物、可溶性糖、维生素C）。结果表明：与对照组相比，鸭粪替BMS-907351生产商代组（DM1-DM4）土壤p H提升6%～21%,40-60cm土层有机质得到提升；DM3处理组对土Genetic alteration壤中有效磷和速效钾的含量提高最为显著；各处理不同土层重金属含量均符合无公害和绿色食品产地对土壤环境的要求。鸭粪替代化肥施用可提升梨品质，较CK处理梨果中可溶性固形物、可溶性糖、维生素C分别提升5.21%～17.44%、2.50%～8.45%、0.39%～11.01%。比较各处理结果表明，鸭粪50%替代化肥处理对土壤环境质量提升效果较优，而鸭粪30%替代化肥处理对提升梨品质效果较优。