DUB信号通路

目的:糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见、致盲风险最高的微血管并发症,也是24-64岁人群视力障碍和失明的主要因素。随着全球糖尿病患者人数的增加,DR已经成为严重威胁人类视觉健康的原因之一。DR是一种前期没有明显视力下降的糖尿病并发症,随着时间的推移,慢性高血糖会引起血-视网膜屏障(blood-retina barrier,BRB)的破损,加重更多神经视网膜损伤,导致视力浑浊或模糊,同时视网膜内新生血管增多,血管渗透性增强导致出血以及黄斑水肿,最终导致失明。因此,研究糖尿病视网膜病变发生发展的分子机制,尤其是血-视网膜屏障破损和血管新生的诱发机制,对于发现有效的诊断和治疗新方法至关重要。BAG5是Bcl-2相关永生基因(Bcl-2-associated athanogene,BAG)抗凋亡基因家族成员,是唯一含有多个BAG结构域且不含其他结构域的家族成员,由5个BAG结构域构成了整个蛋白。BAG5与热休克蛋白HSP70/HCP70之间的相互作用具有双重效果。在正常生理状态下BAG5能够加速HSP70/HSC70介导的蛋白质重折叠。然而在病理状态下BAG5过表达可能会抑制HSP70伴侣蛋白作用,干扰蛋白质重折叠过程。在帕金森病中,BAG5既能发挥神经保护作用,也能促进神经元的损伤以及神经退行性疾病的发生发展。而在肿瘤中,BAG5既能发挥促癌作用,又能发挥抑癌作用。尽管BAG5的作用具有不确定性和矛盾meningeal immunity性,但是BAG5参与调控细胞增殖,细胞迁移和侵袭,肿瘤生长及化疗耐药等生物学过程。近年来BAG5的相关研究主要集中于肿瘤和神经退行性疾病,其与糖尿病视网膜病变的关系尚未见报道。本实验前期研究发现在视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)中高糖诱导BAG5蛋白表达上调,其具体原因及作用机制有待阐明。本文旨在探究高糖诱导BAG5表达上调的原因,及其调控RPE细胞发生上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及发挥促血管生成中的作用。研究方法:1、对单细胞测序数据进行分析,寻找差异表达基因和PROGENy(Pathway Resp Onsive GENes for activity inference)通路富集分析,并利用差异表达基因对细胞进行分群后为细胞信号通路活性打分。2、通过Western blot实验检测高糖培养和常糖培养ARPE19细胞中BAG5的蛋白表达水平。3、通过RT-q PCR检测高糖培养和常糖培养ARPE19细胞中BAG5的基因转录水平。4、利用慢病毒感染细胞,构建稳定敲低BAG5的ARPE19细胞系。5、构建BAG5同义突变质粒和CK2α质粒,分别转染BAG5敲低ARPE19细胞。6、通过Transwell实验检测高糖和常糖培养ARPE19细胞系的迁移能力。7、通过小管形成实验检测高糖和常糖培养ARPE19细胞系的促血管生成能力。8、通过Western blot实验检测高糖和常糖培养ARPE19细胞系中EMT标志物的表达水平。9、通过RT-q PCR实验检测高糖和常糖培养ARPE19细胞系中VEGFA的表达水平。10、通过放线菌酮实验检测BAG5敲低ARPE19细胞中CK2α蛋白稳定性的变化。11、构建含BAG5启动子区域的荧光素酶报告基因载体,利用双荧光素酶报告基因实验检测BAG5启动子活性。12、通过RT-q PCR实验检测高糖和常糖培养ARPE19细胞中转录因子Tcf7l2 Trp53 Nr3c1的表达水平。结果:1、表达BAG5的视网膜细胞和RPE细胞中EMT相关通路和VEGF相关通路的活性更高。2、高糖诱导能提高ARPE19细胞的迁移能力和促血管形成能力。3、BAG5在高糖诱导的ARPE19细胞中表达上调。4、在selleck激酶抑制剂ARPE19细胞中,敲低BAG5降低其迁移能力和促血管形成能力。5、在敲低BAG5的ARPE19细胞中回补BAG5,细胞迁移能力和促血管形成能力得到恢复。6、BAG5通过提高CK2α蛋白稳定性使CK2α表达上调,提高ARPE19细胞迁移和促血管生成能力。7、高糖诱导下BAG5启动子-1500～-1000区转录激活导致BAG5表达上调。结论:BAG5在高糖培养的ARPE19细胞中表达上调,并且BAG5高表达与增强的细胞迁移能力和促血管形成能力密切相关。本文提示BAG5通过调控CK2α蛋白稳定性,促进RPE发生EMT以及发挥促血管生成的作用。

目的 通过建立大鼠牙周炎模型，探讨生物钟蛋白Bmal1对慢性牙周炎相关肾损伤的影响。方法 将12只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和牙周炎组，每组6只。采用正畸结扎丝对牙Navitoclax周炎组大鼠双侧上颌第一磨牙进行结扎处理，对照组大鼠不进行任何干预措施。8周后，检测2组大鼠的牙周临床指标，包括牙周探诊深度、牙龈出血指数和牙齿松动度。采用Micro-CT对大鼠上颌骨进行扫描和三维图像重建，评估牙槽骨吸收情况。采用苏木精-伊红（HE）和过碘酸雪夫（Pgastroenterology and hepatologyAS）染色对牙周组织和肾组织进行病理学观察。采用生化试剂盒检测肾脏功能指标肌酐、白蛋白、血尿素氮的水平，以及氧化应激指标超氧化物歧化酶、谷胱甘肽和丙二醛的水平。MitoSOX red染色检测肾组织内活性氧（ROS）含量。实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和免疫组织化学染色检测大鼠肾组织中Bmal1、核因子-E2相关因子2 (Nrf2)和血红素加氧酶1 (HO-1)的基因及蛋白表达水平。结果 与对照组相比，牙周组织Micro-CT及HE染色结果显示，牙周炎组上颌第一磨牙区出www.selleck.cn/products/CP-690550现明显的骨吸收和附着丧失；肾组织HE及PAS染色结果表明，牙周炎组大鼠肾组织有显著的组织病理损伤；肾功能和氧化应激指标结果显示，牙周炎组的氧化应激水平出现异常而肾功能指标无明显异常；MitoSOX red结果显示，牙周炎组肾组织内ROS含量升高；RT-qPCR和免疫组织化学结果显示，牙周炎组肾组织内Bmal1、Nrf2和HO-1表达水平降低。结论 生物钟蛋白Bmal1在牙周炎大鼠肾脏的氧化损伤过程中发挥重要作用。

在神经退行性疾病的干细胞治疗研究中，人诱导多能干细胞（human induced Pluripotent Stem Cell,hiPSC）体外分化的神经元比较脆弱，移植到体内后容易死亡，是干细胞治疗亟需攻克的难题.条件性表达Bmi-1(BlymphomaMo-MLVinsertionregion1)的hiPSC细胞系（UH10-Dsred+Bmi-1）能够有效抵抗细胞凋亡、显著提高种间嵌合效率，为检测Bmi-1对hiPSC诱导的神经元存活率的影响，本研究在UH10-Dsred+Bmi-1细胞系基础上，转入Tet-on系统调控运动神经元转录因子Ngn2-Isl1-Lhx3(NIL)的表达.在加入强力霉素（Doxycycline,Dox）后，同时诱导Bmi-1和NIL的表达，Food biopreservation获得过表达Bmi-1的神经元.研究表明，过表达Bmi-1的神经元能够抵抗BMS-354825分子量传代应激引起的神经元凋亡、降低肌萎缩侧索硬化症（Amyotrophiclateral sclerosis,ALS）基因突变的小鼠神经胶质细胞（Glia）诱导更多的神经元毒性，从而有效提高神经元的存活率.

为了考察艾叶黄酮异泽兰黄素(eupatilin, EPT)对运动损伤大鼠炎症和抗氧化系统的影响。本研究将SD大鼠分组，每组20只。处理组大鼠分别灌胃不同浓度的异泽兰黄素溶液，灌胃4周。通CH-223191研究购买过力竭运动诱导的运动损伤大鼠模型。对照组大鼠不建模，处理组大鼠在灌胃异泽兰黄素当天开始进行建模。分别检测了大鼠的力竭时间、心肌损伤指标(LDH, CK和c TnI)、心肌TUNEL阳性率、心肌氧化应激(SOD, CAT和MDA)和炎症(IL-1β, IL-6和TNF-α)指标。通过Western blot检测心肌组织中Nrf2和p38 MAPK/NF-κB信号轴的蛋白表达水平。结果显示，3种剂量的异泽兰黄素均提高了大鼠的力竭时间，降低了血清LDH、CK和cTnI水平，降低了心肌组织TUNEL阳性率，升高了心肌组织SOD和CAT水平，降低了心肌组织MDA水平，降低了心肌组织IL-1β、ILMedical Doctor (MD)-6和TNF-α水平，升高了心肌组织细胞核Nrf2、HO-1确认细节和NQO-1蛋白相对表达量，降低了心肌组织Keap1蛋白相对表达量，降低了心肌组织p38 MAPK和NF-κB p65磷酸化水平(P<0.05)。总之，异泽兰黄素剂量依赖性地抑制了力竭运动诱导的心肌损伤大鼠的氧化应激和炎症，并且激活了Nrf2信号轴，抑制了p38 MAPK/NF-κB信号轴。

【目的】对针刺法治疗失眠症伴抑郁障碍文献进行Meta分析和系统评价。【方法】通Erastin过计算机检索中国知网期刊全文数据库（CNKI）、万方学术期刊全文数据库（Wanfang）、维普中文科技期刊数据库（VIP）、中国生物医学数据库（CBM）、美国生物医学信息检索系统（PubMed）、荷兰医学文摘（Embase）、国际循证医学图书馆（Cochrane Library）等各大数据库针刺治疗失眠症伴抑郁障碍的临床随机对照试验文献，检索时间为各数据库自建库以来至2021年2月。由2名评价者独立检索、提取资料和评估方法学质量后，采用RevMan 5.3软件进行Metselleck BMS-354825a分析。【结果】最终纳入15项研究，共计1 161例失眠症伴抑郁障碍患者，分析结果显示：试验组（针刺治疗）与常规西药对照组比较：（1）匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分发现，针刺治疗后PSQI评分低于西药治疗，且差异具有统计学意义[MD=-0.52,95%CI(-0.79,-0.25),P<0.000 01];(2)汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分发现，针刺治疗后HAMD评分低于西药治疗，差异具有统计学意义[MD=-2.28,95%CI(-2.51,-2.04,P<0.000 01];(3)抑郁自评量表（SDS）评分发现，针刺治疗后的HAMD评分低于西药治疗，差异具有统计学意义[MD=-0.34,95%CI(-0.57,-0.10),P<0.000 selfish genetic element01]。【结论】针刺治疗失眠症伴抑郁障碍在改善睡眠质量、抑郁及焦虑症状方面疗效优于西药治疗，具有较好的临床疗效。

目的 基于低氧诱导因子(hypoxia inducible factor, HIF)-1α-血管内皮生长因子(vasculaFerrostatin-1分子量r endothelial growth factor, VEGF)-促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)通路探究电针“百会”“水沟”“足三里”“曲池”治疗脑缺血的作用机制。方法 将108只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。采用线栓法复制右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)大鼠模型。电针组于模型复制后4 h电针“百会”“水沟”和左侧“后三里”(“足三里”)、“曲池”,疏密波，频率5～100 Hz,每次20 min,每日1次，治疗14 d。假手术组、模型组同等抓取固定，不进行治疗。采用改良神经功能缺损体征评分(modified neurological severity scores, mNSS)评价大鼠神经功能损害情况，多普勒超声检测缺血半暗带区局Supervivencia libre de enfermedad部脑血流量(regional cerebral blood flow, rCBF)变化，HE染色观察脑缺血半暗带病理学改变，免疫组织化学法检MLN8237试剂测缺血半暗带区皮质CD34阳性细胞数，Western blot法和RT-PCR法分别检测缺血半暗带区皮质HIF-1α、VEGF、EPO蛋白及其mRNA表达水平。结果 与同时点假手术组比较，模型组大鼠mNSS、CD34阳性细胞数、HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),rCBF显著减少(P<0.05),HE染色可见大量神经元坏死；与同时点模型组比较，电针组大鼠mNSS评分显著减少(P<0.05),rCBF、CD34阳性细胞数及HIF-1α、VEGF、EPO蛋白和mRNA表达水平均显著增加(P<0.05),脑缺血半暗带区病理学改变均有所好转。结论 电针“百会”“水沟”“足三里”“曲池”能激活HIF-1α-VEGF-EPO通路蛋白和基因表达，增加CD34阳性细胞数量，介导内皮细胞血管新生，从而提高MCAO大鼠rCBF,改善脑组织结构和功能，且治疗效果具有时间累积效应。

目的 探讨氧化应激指标超氧化物歧化酶（SOD）、血红素加氧酶（HO-1）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）在HBV相关性肾炎（HBV-GN）患者肾组织中的表达情况，分析其与HBV-GN发生、发展的关系。方法 选取2010至2019年中国医科大学附属盛京医院收治的HBV-GN患者18例为观察组，留取患者肾组织石蜡切片为研究材料。另择2011至2019年本院收治的因肾脏肿瘤或外伤行肾组织切除术患者25例为对照组，留取切除的距病灶最远端的切缘肾组织标本为研究材料。收集两组患者肾功能指标资料，包括24 h尿蛋白、肾小球滤过率、血清肌酐、尿素氮水平。采用免疫组化法检测两组患者肾组织SOD、HO-1、8-OHd G表达水平并进行比较。分析观察组患者肾组织SOD、HO-1、8-OHd G表达水平与肾功能指标的相关性。结果观察组患者肾组织SOD、HO-1、8-OHd G表达水平分别为（1.28×105±6.37×10~4）、（1.13×105±5.05×10~4）、（2.33×105±1.26×10~4）；对照组分别为（324.20±155.08）、（296.67±116.40）、（214.58±42.92）。观察组患者肾组织Gefitinib-based PROTAC 3SOD、HO-1、8-OHd G水平均明显高于对照组（均P<0.05）。观察组患者24 h尿蛋白定量、肾小球滤过率、血清肌酐、尿素氮水平分别为（4.79±2.44）g、（95.51±23.39）ml·min-1·1.73 m~(-2)、（86.32±28.10）μmmol/L、（5.94±1.76）mmol/L,SOD、HO-1、8-OHd G表达水平与以上指标相关性分析显示，观察组患者肾组织HO-1表达水平与肾小球滤过率呈正相关（r=0.667,P<Disaster medical assistance team0.05），其余指标间均无相关性（均P>0.05）。结论 SOD、HO-1、8-O更多Hd G在HBV-GN患者肾组织中表达增强，与疾病的发生、发展有关。HBVGN患者肾组织HO-1表达水平与肾小球滤过率呈正相关。

肉毒毒素中毒是由肉毒杆菌毒素引起的神经麻痹性疾病，多累及颅神FUT-175生产商经和周围神经肌肉接头的突触前膜，表现为松弛性、对称性、下行性瘫痪。由于临床表现多种多样，如无明确可疑食物食用史，易与重症肌无力、吉兰-巴雷综合征等疾病的表现混淆。现报道我院收治的1例以波动性肌无力、双睑下垂、吞咽困难、视物重影为特征的肉毒毒素中毒病例。患者否认食物药物中毒史，疲劳试验阳性，新斯的明试验阳性，最初诊断为重症肌无力，经溴比斯的明、激素、免疫抑制剂治疗后，症状无明显缓解，经过反复详细询问后，患者回忆起其家人和好友轻微乏力和头晕的症状，未在意。几人曾在发病前的不同时间服用过同一罐农村自制生酱。通过血清学检验，Probiotic bacteria患者及其家人、好友均确诊为A型肉毒毒素中毒。肉毒杆菌中毒的救治关键在于早期诊断。对于波动性肌无力、双睑下垂、吞咽困难、视物重影的患者，应详细询问其食用可疑食物的病点击此处史，排除肉毒毒素中毒的可能性，以免误诊和延误治疗。

目的 评价杞参益智方对D-半乳糖注射亚急性衰老模型小鼠学习与记忆能力的改善效应。方法 小鼠皮下注射D-半乳糖构建亚急性衰老动物模型,分别给予阳性药多奈哌齐(2 mg·kg~(-1)·d~(-1))、杞参益智方低剂量组(1.33 g·kg~(-1)·d~(-1))、高剂量组(2.67 g·kg~(-1Pidnarulex分子量)·d~(-1)),连续给药30 d。通过水迷宫和Y迷宫实验评价模型小鼠学习与记忆行为;采用HE染色考察模型小鼠海马损伤情况;采用TUNEL法检测小鼠海马组织凋亡情况;采用ELISA法检测小鼠海马组织中氧化应激因子与炎症因子表达水平;采用Western blot法检测小鼠海马凋亡、氧化应激与炎性应激相关信号通路蛋白表达。结果 杞参益智方水提取物显著缩短模型小鼠水迷宫测试中潜伏期和上台前路程(P<0.01),增加穿越平台次数(P<0.01);增加模型小鼠Y迷宫新臂探索时间和次数(P<0.05);抑制模型小鼠海马TUNEL荧光表达(P<0.01);上调氧化应激因子超氧化物歧化酶(SOD)活力(P<0.05)与谷胱甘肽(GSH)含量(P<medium-sized ring0.05),下调丙二醛(MDA)含量(P<0.05);下调白细胞介素(IL)-1β、IL-6与肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平(P<0.05,P<0.01);下调凋亡信号通路蛋白Cleaved Caspase-3与Caspase-3表达(P<0.05),上调氧化应激信号通路蛋白Nrf2与HO-1表达(P<0.寻找更多05),下调炎性应激信号通路蛋白p-NF-κB与NF-κB表达(P<0.05)。结论 杞参益智方具有改善D-半乳糖注射亚急性衰老模型小鼠学习与记忆能力的作用,可能与其抑制海马氧化应激与炎性应激作用相关。

目的 梳理和总结hereditary melanoma天然药物及中药治疗急性肺损伤机制研究热点及发展趋势，为后续研究提供依据及可行性建议。方法 检索CNKI数据库中天然药物及中药治疗急性肺损伤机制的相关文献，运用CiteSpace软件对关键词进行可视化展示。结果 共纳入文献752篇，涉及关键词475个，形成INCB28060溶解度11个具有代表性的聚类。该领域研究热点主要集中在天然药物及中药的抗炎症、抗氧化、调节细胞自噬和凋亡机制，在此过程中核因子κB是最常涉及的通路因子；研究的治疗药物包括天然药物活性成分、中药材和中成E-616452说明书药。代谢组学、自噬、斑马鱼、分子对接、天然药物活性成分（柚皮素、贝母素甲、木犀草素、甘草酸）是近年研究的新兴主题，抗炎、抗氧化、细胞凋亡、中药材（丹参、川芎嗪、黄芪、大黄）则是跨度较长的经典主题。结论 目前天然药物及中药治疗急性肺损伤研究涉及多种成分、多个靶点，代谢组学和分子对接技术将有助于对天然药物及中药作用机制进行系统研究。