DUB信号通路

为探究硒（Se）对红秆萝卜芽生长、硒累积、品质及抗氧化酶活性的影响，采用不同浓度亚硒酸钠（Se~(4+)）和硒酸钠（SRoxadustat核磁e~(6+)）以浸种+水培方式培养萝卜芽。萝卜芽对Se~(6+)的累积能力较Se~(4+)强且呈剂量-效primary sanitary medical care应关系，最高Se富集量分别为168.37和117.40 mg·kg~(-1)；萝卜芽Se富集系数均随Se浓度升高而减小；与对照相比，低质量浓度Se~(6+)(0.5、1.0 mg·L~(-1)）显著促进了萝卜芽苗高生长和苗质量增大，有效增加了萝卜芽产量；4.0 mg·L~(-1JQ1小鼠)高质量浓度Se~(6+)对萝卜芽总酚和类黄酮表现出抑制作用；Se~(4+)促进了叶绿素和花青素含量的提高；2种Se对萝卜芽POD活性和GSH含量无显著影响，CAT活性均随Se浓度增加表现先升高后降低的趋势，与MDA含量变化趋势相反；SOD酶活性随Se~(4+)浓度增加而持续升高。综合来看，Se~(6+)在促进萝卜芽生长、Se累积和抗氧化酶活性升高方面表现较佳。0.5、1.0 mg·L~(-1)Se~(6+)处理对萝卜芽可食产量、品质和抗氧化能力的提升作用较显著。该研究可以为富硒萝卜芽的实际生产提供理论依据和指导。

目的 研究三种铁死亡诱导剂埃拉斯汀（Era）、柳氮磺胺吡啶（SASP）和青蒿琥酯（Art）与盐酸吉西他滨（hcGEM）单独或联合应用对人胰腺癌PANC-1细Z-IETD-FMK临床试验胞的抑制作用。方法 采用CCK-8法检测不同浓度的Era、SASP、Art单独或联合hcGEM对PANCPanobinostat-1细胞的增殖抑制作用，并根据联合指数(CI)判断三种铁死亡诱导剂联合hcGEM对PANC-1细胞是否具有协同抑制作biodiesel waste用。结果 hcGEM与三种铁死亡诱导剂单独或联合应用均能显著抑制PANC-1细胞活性，并且这种抑制作用随着浓度增大而增强。hcGEM-Era 4∶1或1∶4联用组、hcGEM-SASP 1∶400联用组CI值小于1。hcGEM-Art1∶4或1∶16联用组仅在一定浓度范围内CI值小于1。结论 hcGEM与三种铁死亡诱导剂单独或联合应用对PANC-1细胞的增殖抑制作用呈现剂量依赖性。hcGEM与三种铁死亡诱导剂联用能协同抑制PANC-1细胞的增殖。

以本地三月黄（母本）×青海大黄油菜（父本）远亲杂交获得的79份白菜型油菜（Brassia campestris L.）杂交后代株系为试验材料，对含油量与油品构成因素进行相关性分析。结果表明，79份白菜型油菜株系材料的含油量、油酸、亚油酸、亚麻酸、芥酸、水分、蛋白质、硫苷及饱和脂肪酸等含量变化范围较大，二者间的相关系数分别为-0.756 6、-0.857 1、-0.276 1、0.767 7、-0.555 4、-0.678 5、0.225 9、-0.739 4、0.727 2、0.244 0、-0.954 5、0.679 3、0.427 8、-0.344 6、0.842 9、0.407 9、-0.769 4、0.336 6、0.456 5、-0.256 3、0.742 1、-0.386 5、0.100 2PI3K/Akt/mTOR抑制剂、0.284 5、0.079 1、0.163 0、-0.717 5、-0.393 1、0.438 9、-0.880 9、0.229 0、-0.314 6、0.711 2、0.140 6、0.182 2和-0.427 7。其中，高度线性正相关的有含油量与芥酸（r=0.767 7）、油酸与饱和脂肪酸（r=0.842 9）、亚油酸与饱和脂肪酸（r=0.742 1）、水分与饱和脂肪酸（r=0711 2）；高度线性负相关的有含油量与油酸（r=-0.756 6）、含油量与亚油酸（r=-0.857 1）、含油量与饱和脂肪酸（r=-0.739 4）、油酸与芥酸（r=-0.954 5）、亚油酸与芥酸（r=-0.769 4）、芥酸与水分（r=-0.717 5）、芥酸与饱和脂肪酸（r=-0.880 9）；中度线性正相关的有油酸与水分（r=0.6Tezacaftor半抑制浓度79 3）、油酸与蛋白质（r=0.427 8）Biobased materials、亚油酸与蛋白质（r=0.456 5）、芥酸与硫苷（r=0.438 9）；中度线性负相关的有含油量与水分（r=-0.555 4）、含油量与蛋白质（r=-0.678 5）、硫苷与饱和脂肪酸（r=-0.427 7）。其他相互间都呈低度相关或基本无相关性。

目的 分析面部增生性瘢痕超脉冲CO_2点阵激光术后临床疗效的影响因素。方法 选取2020年9月至2022年9月南阳市中心医院收治的250例面部增生性瘢痕患者作为研究对象，所有患者均行超脉冲CO_2点阵激光治疗，观察患者新版温哥华瘢痕量表（VSS）评分变化情况及临床疗效，并收集患者性别、年龄、体重指数（BMI）、创伤原因、病程、新版VSS评分、皮肤类型等资料，根据治Biolistic delivery疗是否有效（包含痊愈、显效、有效）将患者分为有效组与无效组，分析影响治疗效果的因素。结果 治疗6个月后，250例面部增生性瘢痕患者痊愈34例（13.6%）、显效120例（48.0%）、有效54例（21.6%）、无效42例（16.8%），总有效率为83.2%。根据治疗是否有效将患者分为有效组208例与无效组42例，单因素分析结果显CP-690550核磁示，无效组患者男性以及干性皮肤者比例明显高于有效组（χ~2=5.376、 13.086,P=0.ZD1839细胞培养020、P<0.001），年龄明显大于有效组（t=6.241,P<0.001），病程明显长于有效组（t=6.996,P<0.001），治疗前新版VSS评分明显高于有效组（t=13.850,P<0.001）；多因素Logistic回归分析结果显示，男性、年龄较大、病程较长、治疗前新版VSS评分较高、皮肤类型偏干性是面部增生性瘢痕超脉冲CO_2点阵激光治疗无效的独立危险因素（95%CI为1.054～3.233、 1.234～6.280、 1.492～13.090、 1.687～17.516、 1.102～2.641,P=0.032、 0.013、 0.007、 0.005、 0.016）。结论 超脉冲CO_2点阵激光虽能有效改善面部增生性瘢痕症状，但部分患者受性别、年龄、病程、瘢痕增生程度、皮肤类型影响效果不佳。

目的 探讨替罗非班在急性进展性脑梗死患者中的疗效以及安全性。方法 方便选取Apoptosis抑制剂2021年3月—2022年12月期间苏州市相城人民医院接诊的63例急性进展性脑梗死患者为研究对象，按照随机数表法分成对照组（n=31）和观察组（n=32）。对照组给予常规药物治疗，观察组联合替罗非班进行治疗。对比两组患者美国国立卫生研究院卒中量表（National Institute of Health Stroke Scale, NIHSS）、巴塞尔指数（Barthel Index,BCancer biomarkerI）、血小板情况以及用药后的不良反应发生率。结果 治疗后，观察组患者NIHSS分数显著低于对照组，BI指数显著高于对照组，差Compound C异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者治疗后的血小板计数、血小板分布宽度、血小板平均体积及血小板压积水平均优于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。对照组不良反应发生率为29.03%高于观察组的6.25%，差异有统计学意义（χ~2=3.164,P<0.05）。结论 替罗非班在急性进展性脑梗死患者中疗效确切，安全性较高，可明显改善患者血小板情况和生活能力。

目的 基于超声影像组学特征，建立机器学习模型鉴别小儿肝移植后淋巴组织增生性疾病(PTLD)与淋巴结反应性增生。方法 回顾性分析小儿肝移植后经病理证实的112例PTLD及93例淋巴结反应性增生患者颈部增大淋巴结的二维超声图像。提取影像组学特征构建随机森林、支持向量机、决策树及逻辑回归模型。比较常规超声与4种模型的诊断效能。结果 每个淋巴结共提取118个影像组学特征，筛选7个最优特征建立4种机器学习模型。其中随机森林模型的Surprise medical bills诊断效能最好，优于常规超声[受试者操作特征(ROC)曲线下面积：0.816 vs 0.613,Z=5.991,P<0.05],模型的灵敏度、特异度及准确度分别为95.7%、68.6%及86.0%。结论 基于超声影像组学的随机森PLX-4720林模型对小儿肝移植后PTHydrotropic Agents抑制剂LD与淋巴结反应性增生有较好的鉴别诊断价值。

研究背景与目的:结肠癌是一种对人类危害性大且较为常见的恶性程度高的胃肠道肿瘤之一,随着人们饮食水平的提高,结肠癌的发病风险越来越大。目前,其治疗方法仍然以根治性手术治疗为主,化疗为辅。术后辅助化疗能够降低结肠癌转移和复发的风险,但随着化疗药物耐药的产生,旧药已经越来越不能满足当前的治疗需求,因此需要寻求新的化疗药物以改善患者预后。在结肠癌的所有目前已知的各种致病因素中,已经证实慢性炎症与结肠癌关系更为紧密,多数结肠癌患者的肿瘤组织中存在着炎症浸润的情况。细胞焦亡是一种继细胞凋亡、细胞自噬以来被发现的一种新的程序性细胞死亡方式,其特点是细胞发生肿胀、从细胞膜中冒出大气泡并伴随炎症因子的释放,诱发级联炎症反应。课题组的前期实验发现,新型药物DS6051b处理AZD9291供应商可以引起结肠癌细胞发生Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡。然而,具体机制尚不清楚,DS6051b对结肠癌细胞的生长复制有无明显的抑制作用也有待进一步验证。因此,本论文通过细胞实验,以及利用基因干预等研究手段,阐明DS6051b抑制结肠癌细胞并诱导其焦亡的具体作用分子机制。材料与方法:1.筛选和分析对结肠癌细胞有杀伤作用的药物DS6051b从细胞焦亡化合物库中的39种小分子化合物中,通过使用细胞活性检测试剂CCK-8,进行初筛和2次筛选,为分析筛选结果,采用转录组测序对课题组购买的结肠癌细胞进行融合基因检测。在DS6051b处理后,通过CCK-8评价DS6051b不同时间对结肠癌细胞HCT116和Lo Vo的损伤作用。结晶紫染色检测细胞增殖情况。2.DS6051b诱导结肠癌细胞发生焦亡DS6051b浓度5u M处理结肠癌细胞HCT116和Lo Vo 24h后,分别通过显微镜和扫描电镜观察细胞的形态学变化。通过流式细胞术实验检测HCT116和Lo Vo细胞的Annexin V-PE和7-AAD双阳性比例;通过TUNEL实验和乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)细胞毒性释放试验评价DS6051b对HCT116和Lo Vo细胞的损伤作用。通过免疫印迹(Western Blot,WB)检测细胞焦亡相关蛋白Caspase-3、PARP、GSDME-N的变化情况;采用Caspase-3特异性抑制剂ZVAD预处理HCT116和Lo Vo细胞1h,显微镜观察细胞形态学变化,CCK-8评价DS6051b及抑制剂对HCT116和Lo Vo结肠癌细胞的损伤作用,LDH细胞毒性释放试验评价DS6051b及其抑制剂对HCT116和Lo Vo结肠癌细胞的损伤作用。3.DS6051b通过SRC介导结肠癌细胞焦亡分别通过数据库和文献筛选MK-2206溶解度出DS6051b可能的靶标和结肠癌相关靶标,取交集后作PPI蛋白互作网络,预测DS6051b最可能的作用于结肠癌的靶标SRC。免疫印迹(Western Blot,WB)检测SRC表达情况,检测AKT/m TOR磷酸化的情况。通过病毒质粒转染过表达SRC,在DS6051b处理24h后,再次WB检测SRC以及AKT/m TOR磷酸化的表达情况。细胞活性检测试剂CCK-8评价DS6051b及SRC过表达对HCT116和Lo Vo结肠癌细胞的损伤作用和乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)细胞毒性释放试验评价DS6051b及SRC过表达对HCT116和Lo Vo结肠癌细胞的损伤作用,以及通过流式细胞术实验检测DS6051b及SRC过表达HCT116和Lo Vo细胞的Annexin V-PE和7-AAD双阳性比例;免疫印迹(Western Blot,WB)检测细胞焦亡相关蛋白Caspase-3、PARP、GSDME-N等的变化情况。结果:1.筛选出抑制结肠癌细胞生存效果最佳的小分子化合物DS6051b,DS6051b明显抑制结肠癌细胞增殖。通过对39种小分子进行初次筛选,筛选出5种抑制率均大于70%的小分子化合物,针对这5种小分子化合物进行二次筛选,筛选出针对2种结肠癌细胞抑制率均大于50%的药物,即DS6051b。具文献报道,该小分子对发生ROS1/NTRK基因重排肿瘤有疗效,于是对组中所用结肠癌细胞进行转录组测序,发现并无ROS1/NTRK基因重排。HCT116和Lo Vo细胞分别经1.25、2.5、5、10、20u M浓度处理后24h,细胞活性随DS6051b浓度增长而明显降低。2.DS6051b诱导结肠癌细胞发生Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡DS6051b分别处理HCT116和Lo Vo结肠癌细胞24h后,在显微镜下观察,与对照组相比,细胞数量减少、发生出泡等形态学变化,进一步扫描电镜下观察,与对照组相比,细胞出现孔洞及出泡等变化。流式细胞检测也显示增加了Annexin VPE和7-AAD双阳性细胞数量。WB检测发现DS6051b处理后同时上调了CleavedCaspase-3、GSDME-N、PARP-CL的表达,并且两种细胞株的LDH毒性释放均增加。为了验证DS6051b处理后细胞是否通过Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡,通过Z-VAD预处理HCT116和Lo Vo细胞1h,DS6051b分别处理HCT116和Lo Vo结肠癌细胞24h后,显微镜观察,细胞焦亡情况明显逆转;同时逆转了上调的CleavHip flexion biomechanicsed-Caspase-3、GSDME-N、PARP-CL的表达;HCT116细胞CCK8显示,与DS6051b处理组相比,抑制剂处理组的细胞活性明显回升(p<0.01),Lo Vo细胞CCK8显示,与DS6051b处理组相比,抑制剂处理组的细胞活性同样明显回升(p<0.05);LDH毒性释放实验表明,在HCT116细胞中,与DS6051b处理组相比,LDH毒性释放减少(p<0.001),Lo Vo细胞中LDH毒性释放也相对明显减少(p<0.05)。3.DS6051b抑制SRC/AKT/m TOR磷酸化途径介导结肠癌细胞焦亡,从而导致结肠癌细胞损伤。通过从Swiss Target Prediction网站中获取100个DS6051b可能的作用靶标(表S1),文献中获取DS6051b有效作用激酶靶标202个(表S2),两者求交集得28个DS6051b潜在靶标,再从Dis Ge NET、Genecard、OMIM、uniport数据库中共收集了2388个已知的结肠癌相关基因(表S3),将获取的DS6051b潜在靶标与结肠癌相关靶标交集之后得到10个待选目标,10个待选靶标进行PPI网络构建分析之后,确定SRC作为DS6051b作用于结肠癌的最可能的靶标。药物DS6051b处理HCT116和Lo Vo后,SRC的表达都受到明显抑制,且AKT、m TOR磷酸化也显著减弱。通过病毒质粒转染过表达SRC后,显示逆转了被抑制的SRC以及AKT、m TOR的磷酸化,同时逆转了上调的焦亡相关因子Cleaved-Caspase-3、GSDMEN、PARP-CL的表达,并且逆转了Annexin V-PE和7-AAD双阳性比例。与DS6051b处理组相比,SRC过表达组LDH毒性释放也显著减少(HCT116细胞:p<0.01;Lo Vo细胞:p<0.05)。结论:1.DS6051b抑制结肠癌细胞增殖,抑制率与DS6051b作用浓度呈正相关。2.DS6051b诱导结肠癌细胞发生肿胀、出泡和出现孔隙,并且释放LDH,通过激活Caspase-3裂解GSDME,导致结肠癌细胞发生焦亡;3.DS6051b通过抑制SRC/AKT/m TOR信号通路,激活Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡。

目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病，CHD)患者不同支架置入术后对支架内内膜增生及外周血血清自噬相关蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)水平的影响。方法 选取2018年1月至2021年1月于新乡市第二人民医院介入放射科收治的符合纳入标准的114例CHD患者作为研究对象，按照植入支架类型不同分为聚合物可降解药物涂层支架(BP-DES)组(n=51)和永久性聚合物药物涂层支架(PP-DES)组(n=63)。记录两组患者手术过程中靶血管病变相关情况及置入支架长度等，术后12个月采用血管内超声技术比较两组内膜增生情况，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中Beclin-1,LC3-Ⅱ水平，术后随访1年，记录期间两组发生的主要不良心血管事件(MACE)以及支架内血栓等终点事件发生情况。结果 BP-DES组靶血管病变总数大于PP-DES组，置入支架长度、病变长度小于PP-DES组(regenerative medicineP<0.05)；经超声造影检测，BP-DES组内膜中度增生率为56.86%，高于PP-DES组的38.10%,BP-DES组内膜重度增生率为19.61%，低于PP-DES组的39.68%(P<0.05);BP-DES组外周血Beclin-1,LC3-Ⅱ水平均低于PP-DES组(P<0.05);BP-DES组支架内血栓发生率为1.96%，低于PP-DES组的12.70%(P<0.05)。两组靶血管病变位置、程度、长度、内膜轻度增生率以及总MACE发生率比较，差Dolutegravir试剂异无统计学意义(P>0.05)。结论 与PP-DES相比，冠心病患者置入BP-DES可Imidazole ketone erastin有效改善支架内内膜增生情况，抑制其过度增生，降低Beclin-1,LC3-Ⅱ水平以抑制心肌细胞自噬，同时还可减少支架内血栓的发生。

目的 探讨间充质干细胞来源的细胞外囊泡（MSC-EV）对照射诱导的小鼠放射性肝损伤和肝细胞系损伤的保护作用及相关机制。方法 分别将C57BL/6小鼠随机分为空白组、造模组和MSC-EV治疗组（治疗组），每组9只；将AML12细胞随机分为对照组、照射组和MSC-EV干预组（干预组）。分别通过一次性15 Gy和6 Gy X线照射建立动物和细胞放射性损伤模型，照射后48 h取小鼠的肝组织与血清进行相关实Genetic compensation验，照射后15 h对细胞进行相关检测。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平，肝组织和细胞丙二醛（MDA）含量，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-q PCR）检测白细胞介素（IL）-1β、IL-6、转化生长因子（TGF）-β、CXC趋化因子配体（CXCL）10信使RNA(m RNA)相对表达量，肝组织苏木素-伊红（HE）染色进行肝组织病理损伤评分，脱氧核糖核酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记（TUNEL）染色法、碘化丙啶（PI）染色法分别检测肝组织、细胞凋亡情况，蛋白质印迹法测定谷胱甘肽过氧化酶（GPX）4、铁死亡抑制蛋白（FSP）1的蛋白表达情况，二氢乙啶（DHE）染色检测活性氧簇（ROS）产生水平，并检测线粒体通透性转换孔（m PTP）荧光强度。结果 与空白组比较，造模组小鼠血清AST、ALT水平均增高，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA相对表达量均增加，MDA含量增加，肝损伤评分升高，细胞凋亡率增加，细胞内ROS水平升高，小鼠肝组织GPX4、FSCH-223191化学结构P1蛋白相对表达量下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；与造模组比较，治疗组小鼠血清AST、ALT水平均降低，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA相对表达量均下降，MDA含量减少，肝损伤评分降低，细胞凋亡率下降，细胞内ROS水平降低，小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量增加，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与对照组比较，照射组细胞凋亡率增加，细胞内ROS水平升高，m PTP荧光强度减弱，IL-1β、TGF-β、IL-6的m RNA相对表达量均增加，MDA含量增加，GPX4、FSP1的蛋白相对表达量均下降，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；与照射组比较，干预组细胞凋亡率降低，细胞内ROS水平减少，m Colforsin采购PTP荧光强度增强，IL-1β、TGF-β、IL-6的m RNA相对表达量均降低，MDA含量减少，GPX4、FSP1的蛋白相对表达量均增加，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论 MSC-EV可通过减少肝细胞铁死亡、提高抗氧化水平、减少脂质过氧化物的产生，从而有效缓解照射导致的放射性肝损伤。

目的 建立糖尿病合并新冠病毒（SARS-CoV-2）感染的小鼠模型，研究糖尿病合并COVID-19病程发展中的重要病理生理变化。方法 通过10周的高脂饮食联合连续三天腹腔注射40mg·kg~(-1)的链脲佐菌素诱导野生型小鼠和由细胞角蛋白18基因启动子驱动的人血管紧张素转化酶2受体的转基因小鼠（K18-hACE2）出现糖尿病症状。在此基础上，小鼠经鼻腔滴入15μg的SARS-CoV-2病毒刺突（Spike，S）蛋白与1g·L~(-1)的聚肌胞苷酸（poly[I:C]）的50μL混合溶液，模拟新冠病毒感染。采用苏木精-伊红染色法观察糖尿病小鼠合并S蛋白感染前后的肺部病理改变，Luminex液相芯片技术检测小鼠血浆细胞因子水平，酶联免疫吸附试验检测血浆硫酸乙酰肝素（Heparansulfate，HS）水平；将细胞因子水平、硫酸乙酰肝素水平与小鼠感染S蛋白后的肺部病理损伤程度进行Spearman相关性分析。结果 与非糖尿病小鼠相比，糖尿病小鼠在给予S蛋白后表现出更严重的肺部病理变化。野生型小鼠和hACE2小鼠在给予S蛋白后细胞因子谱有所差异，野生型糖尿病小鼠经S蛋白处理后促炎细胞因子和抗炎细胞因子变化与单纯感染小鼠基本一致或低于单纯感染小鼠，糖尿病合并感染的hACE2小鼠促炎selleck化学及抗炎细胞因子延迟增加，且促炎细胞因子升高程度不及单纯感染的hACE2小鼠。糖尿病合并S蛋白感染引起小鼠血浆中HS水平较非糖尿病感染小鼠和糖尿病小鼠显著升高（P<0.05），升高持续时间更长。小鼠血浆中IL-1β、ICH-223191体外L-10、MCP-1、IP-10、G-CSF以及HS水平与糖尿病合并S蛋白处理小鼠肺损伤Sorptive remediation程度呈正相关。结论 本研究建立的糖尿病合并新冠病毒S蛋白感染小鼠模型能成功模拟出临床患者的部分病理生理特征，主要表现为较单纯感染免疫反应钝化，HS水平升高且持续时间较长。IL-1β、IL-10、MCP-1、IP-10、G-CSF以及HS可能有助于及时掌握糖尿病合并新冠病毒感染患者的病程。