DUB信号通路

目的 探讨大剂量糖皮质激素冲击治疗在重症肌无力患者治疗中的效果,以期为临床治疗提供参考。方法 本研究选取南阳医学高等专科学校第一附属医院2019年1月—2021年12月收治的92例重获悉更多症肌无力患者为研究对象。采用随机数字表法将患者分为对照组与观察组,每组46例。对照组患者采用常规治疗,包括营养支持、免疫抑制剂等。观察组患者在对照组治疗基础上采用大剂量糖皮质激素冲击治疗。治疗结束时,比较2组患者治疗效果。比较2组患者治疗前后(治疗后为治疗结束时)血清乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)水平。治疗结束后比较2组患者临床分型。结果immunotherapeutic target 2组患者治疗效果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,2组患者AchR-Ab水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组患者低于治疗前,且低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者临床分型优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大剂量糖皮质激c-Met抑制剂素冲击疗法能有效治疗重症肌无力,可降低AchR-Ab水平,改善患者临床分型,安全有效,值得推广应用。

目的 探讨黄芩苷对多囊卵Genetic studies巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）大鼠颗粒细胞增殖和凋亡的影响及对磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路的调节作用。方法 48只大鼠成功建立PCOS模型，并随机分为模型组、黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和阳性对照组，每组12只，另取12只大鼠作为对照组。黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组大鼠分别灌胃25、50 mg·kg-1黄芩苷，阳性对照组大鼠灌胃0.339 2 mg·kg-1炔雌醇环丙孕酮片（达英-35），对照组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水，每日1次，连续3周。用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、睾酮（testosterone,T）以及雌二醇（estradiol,E2）含量;用HE染色观察卵巢组织病理损伤，细胞增殖检测试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测颗粒细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率，蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化磷脂肌醇3-GNE-140 NMR激酶(phospho PI3K,pPI3K)、Akt以及p-Akt蛋白相对表达量。结果 对照组大鼠可见黄体，未见囊状扩张卵泡;模型组大鼠卵巢体积变大，少见黄体，可见囊状扩张卵泡;黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组及阳性对照组大鼠卵巢体积变小，可见黄体，囊状卵泡扩增不明显。与对照组比较，模型组FSH和E2水平、颗粒细胞存活率以及p-PI3K和p-Akt蛋白相对表达量降低，LH、T水平和颗粒细胞凋亡率升高（P<0.05）;与模型组比较，黄芩苷低剂量组、黄芩苷高剂量组和阳性对照组FSH、E2水平，颗粒细胞存活率及p-PI3K和p-Akt蛋白相对selleck激酶抑制剂表达量升高，LH、T水平及颗粒细胞凋亡率降低，其中阳性对照组各指标水平变化最显著，其次是黄芩苷高剂量组（P<0.05）。结论 黄芩苷可促进PCOS大鼠卵巢颗粒细胞增殖，抑制凋亡，改善卵巢组织病理损伤，其可能是通过激活PI3K/Akt信号通路发挥作用的。

背景胆管细胞癌(CCA)是一类罕见的、高恶性程度的肝脏癌症,通常预后不良。但近二零年来,胆管细胞癌的死亡率却呈现了全球性增长态势,但5年生存率不足10%。大部分病人在早期并无特殊性表现,在诊断时已表现为晚期或者已出现远处转移。胆管细胞癌的治疗方案现在仍不理想,早期手术切除依然是唯一可能的治疗方案。可惜的是,大多数胆管细胞癌患者对化疗和放射治疗不敏感。因此,在胆管癌的研究中,寻找新的分子标志物和探索其发病机制,是预测早期胆管细胞癌的当务之急。胰岛素样成长因子-2信使RNA结合蛋白3(IGF2BP3)为胰岛素样成长因子2m RNA结合蛋白家族人员一种,这个家族包括IGF2BP1、IGF2BP2和IGF2BP3。IGF2BP3明显参与了早期胚胎发育过程中核糖核酸(RNA)的运输和稳定、细胞生长和迁移。最近的研究也证实,IGF2BP3与多种侵入性和晚期恶性PS-341抑制剂肿瘤都有重要关联,可在多种恶性肿瘤中特异性表现,包括结直肠癌、胃癌、膀胱癌、胰腺癌和肾癌。另外,根据以前的研究文献表明,IGF2BP3型在CCA组中高表现,且与不良的临床结果有关相关。然而,这些研究只报道了IGF2BP3与CCA临床病理的关系,而关于IGF2BP3在CCA分子水平上的基础研究却很少。因此,本研究尝试探索IGF2BP3在胆管癌中发挥的作用和分子作用机制。方法在本研究中,我们将采用分析生物学标志的数据库肿瘤基因组结构图像(TGGA)和基因表现全面信息库(GEO)的数据,探索目的基因IGF2BP3在CCA中的表达。通过GEO官网下载GSE107943患者生存预后资料,以评价IGF2BP3在CCA的预后价值。为了进一步探究IGF2BP3基因在诊断胆管癌中的灵敏性和特异性,提取GSE107943的测序数据,对IGF2BP3进行ROC曲线分析。我们通过免疫印迹分析检测4例胆管癌组织中IGF2BP3的蛋白表达水平。构建sPR-171浓度i RNA-IGF2BP3转染珠进行细胞增殖实验和集落形成实验,证明IGF2BP3促进胆管癌细胞增殖的作用。接下来通过单基因GSEA分析和KEGG富集分析,明确IGF2BP3基因在胆管癌发展中可能潜在的效应途径,并构建过表达IGF2BP3的人类慢病毒载体进行阻断实验,验证IGF2BP3调节PPARD通路的具体效应机制。chaperone-mediated autophagy最后,通过对20对CCA标本进行免疫组化分析,明确IGF2BP3和PPARD通路的相关性。结果实验结果表明,IGF2BP3的m RNA表达率在所有CCA细胞中显著超过了相应的癌旁组织,免疫印迹分析同样证明了这一点。IGF2BP3的高表达与不良预后有关。IGF2BP3的ROC曲线分析显示肿瘤和正常组织之间的AUC值为0.901,表明IGF2BP3具有合理的诊断能力。细胞增殖实验和集落形成实验结果表明,在Hucct-1和RBE细胞中转染si RNA-IGF2BP3后可明显抑制胆管癌细胞的增殖(p<0.05)。GSEA分析和KEGG富集分析显示,IGF2BP3的表达与过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路有关,发现si IGF2BP3沉默的Hucct-1细胞中,PPARD的表达下降,在RBE细胞中也观察到同样的结果,表明IGF2BP3的表达与Hucct-1细胞系的PPARβ/δ(PPARD)一致。通过免疫组化分析,我们发现高表达IGF2BP3的CCA组织也有高PPARD蛋白,低表达IGF2BP3的CCA组织表达低PPARD。我们还发现,加入PPARD抑制剂GSK3787后,即使在Hucct-1细胞系或RBE细胞系中过表达IGF2BP3,CCA细胞的增殖明显受到抑制。另外,在Hucct-1细胞系和RBE细胞系中的集落形成也显示了同样的结果。结论本研究证实,IGF2BP3作为一种肿瘤基因,可以调节胆管癌细胞的增殖。PPARD通路是IGF2BP3发挥作用的一种分子机制。这为未来探索胆管癌增殖机制提供了新的理论依据,也增加了可能成为一种新的胆管癌预后标记物和治疗靶点的可能性。

神经影像学的蓬勃发展推动了脑科学方向日益繁荣,探究神经疾病的病理机制成为当前脑科学、生物医学工程领域的研究热点之一。抑郁障碍是一种非常普遍的心理疾病,其发病率高,反复性强。因此,研究抑郁障碍的发病机制,探索可靠的生理指标,对早期诊断抑郁障碍具有重要意义。功能性近红外光谱(functional Near-Infrared Spectroscopy,f NIRS)与脑电(Electroencephalogram,EEG)技术均为便携式设备,以高安全性等优点在脑科学领域备受关注。针对当前抑郁障碍的诊断缺乏客观性、准确性的标准,并且不能简单有效地识别抑郁障碍患者,本文以f NIRS与EEG信号为研究对象,以特征层融合和决策层融合为研究手段,旨在提高识别抑郁障碍的准确率,为抑郁障碍的临床诊断提供新的方法和依据。具体研究内容如下:(1)基于特征层融合的抑郁识别研究。本文设计了情NSC125066研究购买绪音频刺激范式,在三种情绪状态下,通过f NIRS与EEG同步采集了被试的前额叶脑电和血氧浓度变化信息。首先,为了探索泛化性、可再现的生理指标,本文对单模态的单一特征进行了比较分析oral oncolytic。结果表明,氧交换量的准确率与F1分数均为最高。其次,为了探究双模态下抑郁识别的可靠性和鲁棒性,本文分别对EEG和f NIRS进行了单模态分类研究,然后对EEG和f NIRS在特征层进行了拼接融合。研究发现双模态的平均准确率较单模态都有提高,恐惧情绪刺激下的F1分数提高了0.12%,表明了双模态融合有效提高了抑郁识别的可靠性和鲁棒性。最后,为了探索抑郁识别中简单有效的特征,本文利用最大相关最大距离算法和Relief算法进行了特征选择。研究发现即使用少量的特征也可以提高准确率,为抑郁识别中的Pevonedistat特征选择算法提供了一定的参考意义。(2)基于决策层融合的抑郁识别研究。在Relief特征选择的基础上,构建决策层融合模型,以模态优势互补策略,多角度、多层次分析抑郁障碍表征信息,以实现更鲁棒、准确的抑郁识别。为了充分发挥多个分类器的优势,本文采用了Stacking集成学习模型。结果表明,在高兴情绪刺激下,Stacking结果相比于一级模型准确率提高了5.84%,F1分数提高了4.17%;另外,为了充分发挥双模态数据集的优势,本文还简化了基于内容的决策层融合方法,并应用在Relief特征选择后的数据上。研究发现,准确率提高了3.34%,F1分数提高了2.07%。综上所述,本研究探索了一种EEG与f NIRS双模态融合的抑郁识别方法。在特征层融合的基础上,选用合适的决策层融合方法,可以进一步提升抑郁识别的可靠性和鲁棒性。此外,本文还探究了简单有效的生理指标和特征选择的方法,对抑郁识别研究具有一定的参考意义。

目的：探讨美罗培南（MEP）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠气道重塑的影响及对JAK2-STAT3-RORyt信号通路的调控作用。方法：将40只大鼠随机分为对照组、COPD组、COPD+MEP组和JAK2抑制剂组，每组10只。除对照组外，其余各组复制COPD大鼠模型。COPD+MEP组造模后经臀肌肌肉注射20 mg/kg的MEP,JAK2抑制剂组造模后经臀肌肌肉注射8 mg/kg的AG490。比较各组用力肺活量（FVC）与第0.3秒用力呼气量（FEV_(0.3)）的比值。采用苏木精—伊红（HE）染色观察更多肺组织病理购买GSK2118436形态学改变，分析支气管肺泡灌洗液（BALF）总细胞、中性粒细胞，淋巴细胞和巨噬细胞数量，酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定肺组织白细胞介素（IL）-6、IL-8、肿瘤坏死因子（TNF）-α和IL-1β的含量。分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和western blotting检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原（collagenⅠ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、JAK2、STAT3、RORyt mRNA及蛋白表达。结果：与对照组相比，COPD组大鼠体重和FEV_(0.3)/FVC下降，collagenⅠ、α-SMA、TGF-β1、JAK2、STAT3和RORyt mRNA及蛋白表达水平升高，BALF中总细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量增多，肺组织Ireceptor mediated transcytosisL-8、IL-6、TNF-α和TGF-β1含量升高（均P<0.05）。HE染色显示，COPD组气道黏膜褶皱增多、延长，气管及血管周围大量炎症细胞聚集成团，平滑肌增厚。与COPD组相比，COPD+MEP组和JAK2抑制剂组JAK2、STAT3和RORyt mRNA及蛋白表达水平降低，BALF中总细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量减少，肺组织IL-8、IL-6、TNF-α和TGF-β1含量降低（均P<0.01）。结论：MEP可通过抑制JAK2-STAT3-RORyt信号通路及肺部炎症减轻COPD大鼠气道重塑。

目的 探讨环鸟嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸合成酶/干扰素激活蛋白/TANK结合激酶1(cGPexidartinib作用AS/STING/TBK1)信号通路基因在HPV感染宫颈病变患者中的表达及其BAY 73-4506作用易感因素。方法 回顾性分析2019年3月一2023年3月吉安市中心人民医院收治的151例人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者的临床资料,并作为研究组,151例同期无HPV感染的宫颈病变患者的临床资料作为对照组。比较两组临床资料,采用单因素及多Laboratory Services因素分析法分析宫颈病变患者HPV感染的易感因素;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测cGAS、STING、TBK1 mRNA表达水平;比较研究组和对照组cGAS、STING、TBK1 mRNA表达水平;采用受试者工.作特征(ROC)曲线分析cGAS、STING、TBK1单独及联合检测对宫颈病变患者HPV感染的诊断价值。结果 多因素Logistic回归分析结果显示,年龄大、既往宫颈炎病史、性生活频率高、未使用避孕套、性生活前后无外阴清洗、初次性生活年龄≤20岁、有宫颈癌家族史、初中及以下文化、性伴侣个数≥2个均是宫颈病变患者HPV感染的易感因素(P<0.05);研究组cGAS、STING、TBK1 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);cGAS、STING、TBK1水平联合检测诊断宫颈病变患者HPV感染的曲线下面积(AUC)为0.902,高于各项单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度和特异度为82.80%和82.10%,诊断价值均较高。结论 宫颈病变患者HPV感染后cGAS/STING/TBK1信号通路被激活;联合检测cGAS、STING、TBK1有助于诊断宫颈病变患者HPV感染;宫颈病变患者HPV感染与患者年龄、宫颈炎病史、性生活频率等多种因素有关。

探究青藤碱抑制血小板衍生生长因子/血小板衍生生长因子受体（platelet-derived growth factor/platelet-derived growth factor receptor，PDGF/PDGFR）信号通路在中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps，NETs）诱导类风湿关节炎-成纤维样滑膜细胞（rheumatoid arthritis-fibroblast-like synoviocytes，RA-FLS）迁移作用中的相关机制。从3例selleck化学RA患者滑膜组织中分离培养RA-FLS；从4例RA患者和4例健康体检者GW-572016（healthy control，HC）外周静脉血中提取NETs。RA-FLS分为对照组、HC-NETs组、RA-NETs组、RA-NETs+青藤碱组、RA-NETs+青藤碱+CP-673451组，通过RNA测序（RNA-sequencing，RNA-seq）分析HC-NETs组、RA-NETs组细胞差异表达的基因，使用在线工具Sangerbox数据库进行基因本体论（Gene Ontology，GO）功能分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析，Cytoscape软件构建蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络，使用AutoDock Vina、PyMOL软件对青藤碱与PDGFβ、PDGFRβ作用靶点进行分子对接。通过cell counting kit-8（CCK-8）、划痕实验检测各组RA-FLS增殖、迁移能力，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PDGFRβ蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerase chain reactigenetic overlapon，qRT-PCR）检测基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）相关基因表达。结果显示，RA患者中性粒细胞更易产生NETs。与HC-NETs组相比，RA-NETs组PDGFβ、PDGFRβ表达上调；与对照组相比，RA-NETs组增殖能力、细胞迁移率、PDGFRβ蛋白、PDGFβ、PDGFRβ、MMP1、MMP3、MMP9 mRNA表达水平升高(P<0.05)；与RA-NETs组相比，RA-NETs+青藤碱组细胞增殖能力、细胞迁移率、PDGFRβ蛋白与mRNA表达水平，及MMP1、MMP3、MMP9 mRNA表达水平均降低(P<0.05)。与RA-NETs+青藤碱组相比，RA-NETs+青藤碱+CP-673451组细胞增殖能力减弱(P<0.05)。结果显示，青藤碱通过抑制PDGF/PDGFR信号通路降低RA-NETs诱导RA-FLS迁移能力，实现对RA的缓解效果。

目的：综合评价金花茶花的降血糖和寻找更多抗氧化作用。方法：制备金花茶花水提物（CFA），利用高效液相色谱-质谱联用法进行组分鉴定；同时，建立2型糖尿病小鼠模型并随机分为模型组，Lewy pathology阿卡波糖阳性组Elexacaftor（20 mg/kg m_(b)），CFA低、中、高剂量组（200、400、800 mg/kg m_(b)）。灌胃干预5 w后，分析各组小鼠一般生长特征，血清中血糖、胰岛素及血脂水平，胰、肝脏氧化应激水平、组织形态变化及细胞凋亡情况。结果：金花茶花具有较高的多酚、多糖含量，清除DPPH·和抑制α-葡萄糖苷酶的IC_(50)分别为（24.14±0.64）、（69.99±1.97）μg/mL，从金花茶花中鉴定出7种主要化合物。此外，金花茶花可有效改善糖尿病小鼠“三多一少”症状，显著降低小鼠空腹血糖、餐后血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、丙二醛水平，升高胰岛素、高密度脂蛋白的含量，提升总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性，减轻胰脏、肝脏组织的病理损伤。结论：金花茶花对2型糖尿病小鼠具有显著的降血糖及抗氧化作用。

为了探明碱胁迫对杂交鲟鲟龙1号皮肤生理功能的影响，采用转录组测序的方法和皮肤组织学切片研究观察了碱Hepatic lineage胁迫与正常养殖水质条件下杂交鲟皮肤组织的分子特征和组织结构。结果发现，对照组与胁迫组差异表达基因总数量(DEGs)为1 849个，其中1 302个基因在胁迫组的皮肤组织中上调，547个基因下调。对差异表达基因进行GO聚类，主要富集在胞浆钙离子浓度的调节、肌肉收缩、肌钙蛋白复合物、肌钙蛋白T结合、肌钙蛋白C结合等7个GO term上。KEGG富集分析发现，甘氨酸、丝氨酸和苏Colforsin MW氨酸代谢，蛋白质的消化和吸收，淀粉和蔗糖代谢等为显著富集通路。代谢通路互作网络分析发现，碱胁迫下鲟龙1号皮肤核心代谢途径为黏着斑、蛋白质消化吸收和血小板活化GSK126分子量、补体和凝血级联及缺氧诱导因子-1信号通路等途径为主效途径。组织切片结果显示，杂交鲟在碱胁迫下皮肤组织和肾脏组织受到严重损伤，肾小球和肾小管发生明显皱缩，远曲小管萎缩尤为明显，肾小球上皮细胞体积减小，管壁变薄甚至脱落；皮肤组织的黏液细胞数量随碱度的升高而增多，棒状细胞细胞核发生固缩现象，在碱胁迫下排列更加紧密。揭示了鲟龙1号皮肤组织碱胁迫响应相关基因的总体表达特征，同时可为鲟鱼盐碱驯养提供参考。

目的:探讨芹菜素对大鼠脑外伤(TBI)的保护作用及其机制。方法:72只雄性SD大鼠被随机分为对照组(24只)、TBI组(24只)和TBI+芹菜素组(24只),采用Feeney法自由落体打击装置建立大鼠TBI模型，TBI+芹菜素组在造模后每天腹腔注射芹菜素(40 mg/kg),持续3 d。取大鼠伤侧皮层，免疫组化检测神经微丝中链蛋白(NF-M)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及离子钙接头蛋白抗体-1(Iba-1)的表达；Western blot检测紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1、Occludin-1的表达；伊文斯蓝及脑组织含水量检测血脑屏障通透性情况；ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的水PLX4032临床试验平，利用丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测氧化应激水平。结果:与对照组相比，TBI组大鼠皮层中NF-M、GFAP、Iba-1、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA的表达均升高(均P<0.05);伊文斯蓝及脑组织含水量均增加(均P<0.05);Claudin-5、ZO-1、Occludin-1、SOD、CAT及GSH-Px的表达均降低(均P<0.05)。与TBI组相比，TBI+芹菜素组NF-M、GFAP、Iba-1、TNF-α、IL-1selleck Liraglutideβ、IL-6、MDA的表intestinal dysbiosis达均降低(均P<0.05);伊文斯蓝及脑组织含水量均减少(均P<0.05);Claudin-5、ZO-1、Occludin-1、SOD、CAT及GSH-Px的表达均升高(均P<0.05)。结论:芹菜素通过抑制胶质细胞活性，降低体内的炎症及氧化应激水平，保护血脑屏障，减轻大鼠TBI后的神经损伤。