背景胆管细胞癌(CCA)是一类罕见的、高恶性程度的肝脏癌症,通常预后不良。但近二零年来,胆管细胞癌的死亡率却呈现了全球性增长态势,但5年生存率不足10%。大部分病人在早期并无特殊性表现,在诊断时已表现为晚期或者已出现远处转移。胆管细胞癌的治疗方案现在仍不理想,早期手术切除依然是唯一可能的治疗方案。可惜的是,大多数胆管细胞癌患者对化疗和放射治疗不敏感。因此,在胆管癌的研究中,寻找新的分子标志物和探索其发病机制,是预测早期胆管细胞癌的当务之急。胰岛素样成长因子-2信使RNA结合蛋白3(IGF2BP3)为胰岛素样成长因子2m RNA结合蛋白家族人员一种,这个家族包括IGF2BP1、IGF2BP2和IGF2BP3。IGF2BP3明显参与了早期胚胎发育过程中核糖核酸(RNA)的运输和稳定、细胞生长和迁移。最近的研究也证实,IGF2BP3与多种侵入性和晚期恶性PS-341抑制剂肿瘤都有重要关联,可在多种恶性肿瘤中特异性表现,包括结直肠癌、胃癌、膀胱癌、胰腺癌和肾癌。另外,根据以前的研究文献表明,IGF2BP3型在CCA组中高表现,且与不良的临床结果有关相关。然而,这些研究只报道了IGF2BP3与CCA临床病理的关系,而关于IGF2BP3在CCA分子水平上的基础研究却很少。因此,本研究尝试探索IGF2BP3在胆管癌中发挥的作用和分子作用机制。方法在本研究中,我们将采用分析生物学标志的数据库肿瘤基因组结构图像(TGGA)和基因表现全面信息库(GEO)的数据,探索目的基因IGF2BP3在CCA中的表达。通过GEO官网下载GSE107943患者生存预后资料,以评价IGF2BP3在CCA的预后价值。为了进一步探究IGF2BP3基因在诊断胆管癌中的灵敏性和特异性,提取GSE107943的测序数据,对IGF2BP3进行ROC曲线分析。我们通过免疫印迹分析检测4例胆管癌组织中IGF2BP3的蛋白表达水平。构建sPR-171浓度i RNA-IGF2BP3转染珠进行细胞增殖实验和集落形成实验,证明IGF2BP3促进胆管癌细胞增殖的作用。接下来通过单基因GSEA分析和KEGG富集分析,明确IGF2BP3基因在胆管癌发展中可能潜在的效应途径,并构建过表达IGF2BP3的人类慢病毒载体进行阻断实验,验证IGF2BP3调节PPARD通路的具体效应机制。chaperone-mediated autophagy最后,通过对20对CCA标本进行免疫组化分析,明确IGF2BP3和PPARD通路的相关性。结果实验结果表明,IGF2BP3的m RNA表达率在所有CCA细胞中显著超过了相应的癌旁组织,免疫印迹分析同样证明了这一点。IGF2BP3的高表达与不良预后有关。IGF2BP3的ROC曲线分析显示肿瘤和正常组织之间的AUC值为0.901,表明IGF2BP3具有合理的诊断能力。细胞增殖实验和集落形成实验结果表明,在Hucct-1和RBE细胞中转染si RNA-IGF2BP3后可明显抑制胆管癌细胞的增殖(p<0.05)。GSEA分析和KEGG富集分析显示,IGF2BP3的表达与过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)信号通路有关,发现si IGF2BP3沉默的Hucct-1细胞中,PPARD的表达下降,在RBE细胞中也观察到同样的结果,表明IGF2BP3的表达与Hucct-1细胞系的PPARβ/δ(PPARD)一致。通过免疫组化分析,我们发现高表达IGF2BP3的CCA组织也有高PPARD蛋白,低表达IGF2BP3的CCA组织表达低PPARD。我们还发现,加入PPARD抑制剂GSK3787后,即使在Hucct-1细胞系或RBE细胞系中过表达IGF2BP3,CCA细胞的增殖明显受到抑制。另外,在Hucct-1细胞系和RBE细胞系中的集落形成也显示了同样的结果。结论本研究证实,IGF2BP3作为一种肿瘤基因,可以调节胆管癌细胞的增殖。PPARD通路是IGF2BP3发挥作用的一种分子机制。这为未来探索胆管癌增殖机制提供了新的理论依据,也增加了可能成为一种新的胆管癌预后标记物和治疗靶点的可能性。