DNA双链损伤修复蛋白RAD51在伪狂犬病病毒复制中的功能研究

本研究旨在系统探究DNA双链损伤修复蛋白RAD51在伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)复制中的作用。首先采用PRV感染不同物种来源的细胞系，通过Western-blot、RT-PCR及RT-qPCR检测病毒感染前后RAD51表达水平的变化；随后利用慢病毒包装系统构建RAD51稳定过表达及敲低的A549细胞系，并通过Western-blot、PCR检测PRV在对照细胞和RAD51过表达或敲低细胞中复制效率；同时检测RAD51特异性抑制剂(IEmricasan体外BR2、B02和DIDS)对PRV复制的影响。结果显示，PRV感染可显著下调不同宿主细胞中RAD51的表达水平。Western-blot、RT-PCR结果表明，与野生型细胞相比，PRV在RAD51过表达细胞中的复制显著增强，而在RAD51敲低细胞中的复制明显减弱。此外，Western-blot、RT-qPCR及RT-PCR结果显示，3种RAD51抑制剂(IBRpediatric oncology2、B02和DIDS)均可显著降低PRV在细胞中的复制。本研究证实RAD51能够显著促进PRV的复制，这一发现为深入阐明更多PRV与宿主DNA损伤修复系统的相互作用提供理论依据。