目的本课题建立和评价两种稳定的高眼压青光眼大鼠模型,利用模型进行三种降眼压药物体内和体外药效评价研究。以建立能够模拟人青光眼发病特征的大鼠模型,推动青光眼非临床评价和机制研究。方法向大鼠前房注射一定量磁珠悬液、氩激光光凝排空房水的大鼠角膜缘和巩膜外静脉,诱导大鼠眼压升高。将高眼压大鼠按眼压随机分组并分别给予复方制剂布林佐胺溴莫尼定滴眼液和它的两种成分药物布林佐胺滴眼液、溴莫尼定滴眼液,正常对照组和模型对照组不给药。通过测量眼压、前节拍照、眼底照相、OCT、视网膜电图和组织urine liquid biopsy病理学检查等评价模型和药物药效。利用手动膜片钳检测急性分离的RGCs的离子通道电流和自发放电,并在体外细胞给药,研究RGCs凋亡和药物保护作用。结果前房注射20 μL浓度为12.5selleck抑制剂 mg·mL-1和50 mg·mL-1磁珠均可诱导大鼠眼压明显升高。12.5 mg·mL-1磁珠诱导大鼠眼压升高成功率约40%,前节屈光介质相对清晰;50 mg·mL-1诱导成功率在80%以上,但无法保证屈光介质清晰。利用532 nm氩激光光凝放房水后的大鼠角膜缘和巩膜外静脉,可稳定升高大鼠眼压约2周,且屈光介质比12.5 mg·mL-1磁珠组大鼠更清晰。两种模型均可见高眼压所致的前节改变、视盘萎缩和视功能损伤等病理改变,与青光眼临床表现相似。三种降眼压药物在该两种模型眼压升高的不同时期各表现出一定的降眼压效果,但与模型对照组相比仅个别时间点有统计学差异。复方制剂仅在个别时间点表现出比两种成分药物略佳的降眼压效果。可能与动物眼前节炎症代偿性眼压升高、眼压过高超过药物的降压阈值、个体间眼压差异大等因素有关。前房注射10 μL浓度为50 mg·mL-1的磁珠诱导大鼠高眼压持续4周,在眼压峰值期RGCs钠通道电流升高。1μM溴莫尼定使其钠离子通道电流降低,可能有一定的神经保护作用。结论1.12.5 mg·mL-1、50 mg·mL-1磁珠均可成功诱导建立大鼠高眼压青光眼模型,应根据不同实验目的选择合理的磁珠浓度和相应的评价方法。2.使用532 nm氩激光光凝排空房水后的大鼠角膜缘和巩膜外静脉,可维持眼压升高2周,屈光介质比注射12.5 mg.mL-1磁珠的大鼠更佳。3.三种降眼压药物在我们建立的两种高眼压模型中未表现出预期的降压效果。可能与动物眼前节炎症代偿性眼压升高、眼压过高超过药物的降压阈值、动物数量少、个体间眼压差异大等因素有关。4.磁珠诱导的高眼压大鼠在眼压峰值期RGCs钠BYL719作用通道电流升高。1 μM溴莫尼定使其钠离子通道电流降低,可能有潜在神经保护作用。