脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导胃上皮细胞肠化生的影响

目的 探究脾胃培源方含药血清对鹅去氧胆酸诱导的人胃上皮细胞(GES-1)肠上皮化生的影响及其潜在作用机制。方法 (1)采用CCK-8法检测不同浓度鹅去氧胆酸(0,20,50,100,150,200μmol/L)、脾胃培源方含药血清(0,2.5%,5%,10%,20%,30%,40%)对GES-1细胞活性的影响,确定后续实验鹅去氧胆酸和PCI-32765 MW脾胃培源方含药血清浓度。(2)实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,CCK-8法检测各组GES-1细胞活性。(3)实验分为空白对照组、20%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,ELISA法检测炎症因子与氧化应激相关指标水平[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]。(4)实验分为空白对照组、鹅去氧胆酸组、鹅去氧胆酸+5%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组、鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测肠上皮化生相关分子标志物(CDX1、CDX2、MUC2)蛋白及mRNA表达情况。结果 选择100μmol/L的鹅去氧胆酸和5%,10%,20%脾胃培源方含药血清进行后续实验。各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各浓度脾胃培源方含药血清组GES-1细胞活性呈剂量依赖性降低。与空白对照组比较,鹅去氧胆酸组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显升高(P均<0.0寻找更多5),SOD水平明显降低(P<0.05);与鹅去氧胆酸组比较,鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组IL-6、IL-8、TNF-α、MDA水平均明显降低(P均<0.05),SOD水平明显升高(P<0.05)。鹅去氧胆酸组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达Microscopes and Cell Imaging Systems量均明显高于空白对照组(P均<0.05);鹅去氧胆酸+10%脾胃培源方含药血清组和鹅去氧胆酸+20%脾胃培源方含药血清组CDX1、CDX2、MUC2蛋白及mRNA相对表达量均明显低于鹅去氧胆酸组(P均<0.05),且各指标呈一定浓度依赖性降低。结论 脾胃培源方可通过抑制炎症与氧化应激反应,下调肠化标志物CDX1、CDX2、MUC2的表达,从而抑制鹅去氧胆酸诱导的GES-1肠上皮化生。