玉蚕颗粒改善足细胞损伤治疗糖尿病肾病的机制研究

目的 观察玉蚕Others抑制剂颗粒对糖尿病肾病(DN)小鼠的治疗作用并探讨其作用机制。方法 将80只SPF级雄性c57小鼠随机分为正常组和造模组。正常组10只小鼠予普通饲料;造模组70只小鼠采用高脂高糖饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立DN小鼠模型。将50只造模成功的小鼠再随机分为模型组、氯沙坦钾组(氯沙坦钾10 mg/kg)及中药低、中、高剂量组(玉蚕颗粒1.5、3、6 g/kg),每组10只。给药组予相应药物灌胃处理,正常组及模型组以质量分数为0.9%的氯化钠溶液灌胃,每日1次,持续给药4周。(1)观察小鼠的一般状态,并比较给药前后的体质量变化;给药结束后检测血清空腹血糖(FBG);(2)采用苏木精-伊红(HE)染色、丽春红酸性品红-苯胺蓝(Masson)染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色观察肾组织病理变化;(3)采用透射电镜观察肾小球足细胞超微结构变化;(4)采用免疫组织化学法检测足细胞标志蛋白足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、肾母细胞瘤基因1蛋白(WT1)阳性表达情况,并采用蛋白质免疫印迹(Western blotImmunomodulatory drugs)法检测Nephrin、WT1蛋白表达水平。结果 (1)与正常组比较,模型组小鼠的一般状态较差,体质量下降,FBG升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠状态好转、体质量升高、FBG下降,其中中药中、高剂量组FBG差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HE、Masson及PAS染色显示:与正常组比较,模型组小鼠肾小管管壁变薄、管腔扩张、炎症细胞浸润、肾间质纤维组织增生;与模型组比较,Navitoclax说明书中药各剂量组小鼠肾小管管壁变薄、管腔扩张、纤维组织增生有所减轻、炎症细胞浸润减少。(3)透射电镜观察显示:与正常组比较,模型组小鼠肾小球足细胞足突相互融合、部分足突消失;与模型组比较,中药各剂量组足突融合、消失情况明显好转,且中药中、高剂量组对足细胞损伤的改善效果较明显。(4)免疫组织化学染色结果与Western blot结果显示:与正常组比较,模型组肾组织Nephrin、WT1表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,中药各剂量组小鼠肾组织Nephrin、WT1表达显著升高(P<0.05)。结论 玉蚕颗粒可通过降低DN小鼠血糖水平、减轻肾脏组织炎症细胞浸润、改善足细胞损伤,从而治疗糖尿病肾病。