海洋蛋白质作为生物活性肽的宝贵来源,引起了研究者们对其在肠道益生菌相关方面应用的广泛关注。本研究以金枪鱼骨为原料,采用酶解法制备出了胶原蛋白水解物,进一步探究了胶原蛋白水解物作为益生元促进益生菌增殖及其益生特性的应用潜力。首先,以碱性蛋白酶为催化剂,制备了金枪鱼骨胶原蛋白水解物,并研究了胶原蛋白水解物的氨Talazoparib作用基酸组成、分子量及其分布。结果表明,该胶原蛋白水解物富含益生菌生长所必需的甘氨酸、谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸,分子量小于500 Da的组分含量高于50%;分析了所制备的胶原蛋白水解物中含有多肽氨基酸序列,通过生物活性预测,筛选出了五条生物活性较高的胶原蛋白肽,其中序列为plant bacterial microbiomeGLp GPLGPp GPR的多肽预测的生物活性相对较高,这为胶原蛋白水解物促进益生菌增殖作用提供了理论依据。其次,探究了所制备的胶原蛋白水解物对两种益生菌(鼠李糖乳杆菌、大肠杆菌E.coli Nissle1917)在不同生长条件下的体外生长的促进作用。研究在模拟胃肠环境下胶原蛋白水解物对益生菌存活率的影响,并揭示了其影响规律。结果表明,所制备的金枪鱼骨胶原水解物能够促进两种益生菌在不同生长条件下的增殖;体系中胶原蛋白水解物浓度为4mg/m L时就可以显著提高鼠李糖乳杆菌的耐酸能力;胶原蛋白水解物作为培养基的功能助剂,可以提升所培养的大肠杆菌E.coli Nissle1917的耐酸耐胆盐能力。研究证明,胶原蛋白水解物可以提升其在模拟胃肠消化后的存活率。第三,研究了胶原蛋白水解物对两种益生菌的益生特性的影响,包括疏水性、自聚力、对病原菌的共聚能力、对病原菌的获悉更多抑制能力以及对益生菌抗氧化活性的影响等。结果表明,胶原蛋白水解物对两种益生菌的疏水性、自聚力无明显抑制作用,提高了鼠李糖乳杆菌对病原菌的共聚能力,同时降低了沙门氏菌的疏水性,这有利于鼠李糖乳杆菌在肠道中的竞争性黏附。胶原蛋白水解物的添加提高了鼠李糖乳杆菌抑制大肠杆菌、沙门氏菌的能力。证明了胶原蛋白水解物具有良好的抗氧化活性,缓解了益生菌在H_2O_2条件下面临的氧化应激。最后,通过溶血测试、抗生素敏感性测试、硝酸盐还原酶活性测试等一系列实验证实了添加胶原蛋白水解物培养的益生菌无溶血毒性并且不会造成耐药性,同时不会产生硝酸盐还原酶。胶原蛋白水解物作为未来益生菌食品研究领域的新兴益生元具有一定安全性。