人参(Panax ginsengC.A.Mey.)是我国重要的传统名贵中药材。由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的人参灰霉病近年在我国人参主产区发生普遍,对栽培人参的产量、质量构成较大威胁。目前,人参灰霉病防治主要依赖化学杀菌剂,农药滥用导致人参灰霉病菌对多菌灵、嘧霉胺、异菌脲等常用杀菌剂均已产生了不同程度的抗药性,上述杀菌剂对人参灰霉病的防效显著下降甚至丧失,人参灰霉病面临巨大的防控风险。为此,本研究采用菌丝生长速率法测定了人参产区102株灰霉病菌对啶酰菌胺和吡唑醚菌酯的抗药性水平和抗性频率,明确了人参灰霉病菌对两种常用杀菌剂的抗性现状;采用特性引物扩增方法分析了抗药性基因的碱基突变情况,明确了抗药性基因位点的碱基点突变类型及与抗药性水平、地域性的相关度;采用菌丝生长速率法建立人参灰霉病菌对咪鲜胺的敏感性基线,通过室内诱导方式得到咪鲜胺的抗药性突变体,探究了抗药性突变体的稳定性、适合度及交互抗性等。主要研究结果汇总如下:1.检测了人参灰霉病菌对啶酰菌胺和吡唑醚菌酯的抗药性水平,明确了杀菌剂间的交互抗性。我国人参主产区灰霉病菌对啶酰菌胺的抗药性呈现上升趋势,抗性频率为32.35%,EC50值范围0.256 μg/mL～235.868 μg/mL。其中黑龙江省人参灰霉病菌对啶酰菌胺的抗性频率最高,吉林省人参灰霉病菌居中,辽宁省人参灰霉病菌的抗性频率最低。人参产区灰霉病菌对吡唑醚菌酯抗性频率和抗性水平整体较高,抗性频率高达94.12%,EC50值范围1.348 μg/mL～487.724μg/mL。吉林省、黑龙江省和辽宁省人参灰霉病菌的抗性频率分别达到89.89%、97.22%和100%,交互抗性分析结果显示,啶酰菌胺和吡唑Lorlatinib分子量醚菌酯之间不存在交互抗药性。2.明确了人参灰霉病菌对啶酰菌胺和吡唑醚菌酯抗性基因碱基突变类型以及突变位点的出现与抗药性水平和地域来源的multiple antibiotic resistance index关系。人参灰霉病菌的啶酰菌胺抗药性相关琥珀酸脱氢酶基因sdhA、sdhD未发现碱基突变,sdhC片段发生G85A+I93V+M158V+V168I四位点突变,与抗药性水平及地域来源无明显相关性。sdhB片段发现P225F、P225L、H272R、H272Y、N230I五种类型的碱基突变。P225F与啶酰菌胺抗药性相关度最高,且存在地域性差异。P225L与啶酰菌胺抗药性相关度较高,无地域性差异。H272R与抗药性相关性不大,地域差异性明显。H272Y和N230I在我国人参产区的发生频率较低,分别仅各有1株。人参灰霉病菌对吡唑醚菌酯的抗性基因cytb未发现129号位点突变,143号位点G143A突变发生频率为97.06%。发生G143A突变的99个灰霉菌菌株的抗性频率高达96.97%,含Bcbi-143/144内含子片段的菌株均对吡唑醚菌酯敏感。3.建立了人参灰霉病菌对咪鲜胺的敏感性基线,评估了咪鲜胺用于人参灰霉病防治的抗药性风险。供试102株人参灰霉病菌对咪鲜胺的敏感性频率分布呈连续变化,EC50值范围0.0048 μg/mL～0.0629 μg/mL。依据满足正态分布的89株人参灰霉病菌对咪鲜胺的EC50均值(0.018 μg/mL)建立灰霉病菌对咪鲜胺的敏感基线。经室内诱导突变体实验,药剂驯化和紫外诱导共得到9DNA/RNA Synthesis抑制剂株正常生长的人参灰霉病菌菌株。根据已建立的敏感基线,3株划分为敏感型菌株,6株划分为抗性菌株。6株抗性突变体不稳定。抗药性突变体的生长速率、产孢量及致病力均低于亲本菌株,表现出较低的适合度。交互抗性分析结果显示,咪鲜胺与啶酰菌胺、吡唑醚菌酯、异菌脲和嘧霉胺无明显交互抗性。综合来看,咪鲜胺用于灰霉病防治的抗药性风险较低。