研究背景:胰腺导管上皮细胞及其分泌物构成了胰管黏膜屏障,该屏障在正常combined bioremediation生理状态下可防止胆汁、胰蛋白酶等反流进入胰腺实质。在急性胰腺炎发展过程中紧贴胰腺导管内侧的上皮细胞处于胰液病理微环境的直接刺激下,一旦受损会导致胰液发生外渗,从而加快急性胰腺炎的发展。研究目的:研究胰腺导管上皮细胞在胰液微环境发生损伤的机制,寻找减缓该损伤的可能治疗靶点。研究方法:细胞实验:利用收集的胰液模拟急性胰腺炎病理过程中胰腺导管上皮细胞所处的微环境,检测细胞的增殖情况。凋亡检测试剂盒鉴定细胞凋亡的情况,荧光显微镜观察细胞在胰液微环境下自噬流的发生,检测自噬和信号通路抑制剂干预后细胞自噬及凋亡标志分子的表达情况。使用雨蛙素和脂多糖建立胰腺炎动物模型,进行以下检测:血清脂肪酶、淀粉酶的检测,胰腺组织的HE染色,胰管凋亡蛋白。结果:(1)胰液蛋白浓度为0.6μg/μL时,胰腺导管上皮细胞的增殖率逐渐下将。胰液蛋白浓度为(1.2μg/μL,1.5μg/μL)时抑制作用最明显。(2)胰液蛋白浓度为(1.2μg/μL,1.5μg/μL)时,上皮细胞凋亡率显著上升。(3)在胰腺导管细胞发生凋亡的机制过程中,自噬被胰液病理微环境强力诱导。在胰液蛋白浓度为1.5μg/μL时,胰腺获悉更多导管上皮细胞的自噬流被促进。(4)利用自噬抑制剂3-MA可降低胰液微环境中胰腺导管上皮细胞的凋亡率及凋亡标志分子的表达。(5)p38 MAPK信号通路介导自噬参与调控胰腺导管上皮细胞的凋亡,利用该信号通路抑制剂干预后发现干预组中自噬蛋白表达降低,同时凋亡蛋白表达也降低。(6)在动物模型中胰腺导管上皮细胞存在凋亡蛋白表达增加,利用自噬抑制Dibutyryl-cAMP体外剂可降低胰管组织凋亡蛋白的表达。结论:在急性胰腺炎胰液微环境中,p38 MAPK信号通路被激活促进胰腺导管上皮细胞发生过度自噬进而诱导凋亡。在动物模型中,同样存在胰腺导管上皮细胞凋亡的发生,自噬抑制剂3-MA干预之后可减轻胰腺导管上皮细胞凋亡的发生。