目的:本课题通过无创酒精灌胃法构建酒精性脂肪肝大鼠模型,西红花苷进行药物治疗,通过观察生化指标、组织病理学变化来探讨西红花苷对酒精性脂肪肝大鼠肝组织中JNK1及c-Jun表达的影响。方法:清洁级SD雄性大鼠45只,随机均分为三组,对照组(Blank组)15只、酒精肝模型组(Alco-M组)15只及西红花苷组(Crocin-T组)15只。先适应性喂养1 w,然后Alco-M组及Crocin-T组以40%的乙醇(4 g/kg,q12h)灌胃至第4 w末,从第5 w始调整为50%的乙醇(4.5 g/kg,q12h)灌胃至第8 w末;Blank组予等量灭菌水;Alco-M组、Crocin-T组分别于灌服乙醇1 h后给予等量的灭菌水、西红花苷25 mg/kg(注:西红花苷加入灭菌注射用水中溶解,制成质量浓度为0.2 mg/m L的药液并进行分装保存备用),Blank组予等量灭菌水。8 w末取大鼠血清及肝组织行生化学、病理学(具体为HE染色、油红染色、Masson染色)及免疫组化检测,实验过程中死亡或未达模型标准大鼠不纳入实验。应用ImaGW4869ge-ProMedidas posturales Plus 6.0(后文简称IPP)对JNK1、c-Jun免疫组化的表达进行半定量测定,所得数据采用SPSS 23.0进行统计学分析。结果:结合生化、病理学改变证明无创酒精灌胃法构建酒精性脂肪肝大鼠模型造模成功。1.体重及增长率:(1)三组大鼠体重均较8 w前增长(r<0.05);(2)Alco-M组与Blank组比较,存在显著性差异(r<0.05);(3)Crocin-T组与Blank组比较,存在显著性差异(r<0.05);Crocin-T组与Alco-M组比较,无显著性差异(r>0.05)。2.生化:(1)Alco-M组、Crocin-T组ALT、AST、LDL-C水平较Blank组均明显升高(r<0.05),其中AST升高程度较ALT更为显著(r<0.05);Crocin-T组其上述指标水平均较Alco-M组下降(r<0.05);(2)Alco-M组与Blank组及Crocin-T组比较TRIG水平、CHOL水平,差异显著(r<0.05);Crocin-T组与Blank组比较TRIG水平、CHOL水平,差异不显著(r>0.05);(3)Blank组、Alco-M组及Crocin-T组三者HDL-C水平差异不显著(r>0.05)。3.病理学:肝组织行HE染色、油红O染色及Masson染色处理,结果示:(1)Blank组:肝组织形态结构正常,(2)Alco-M组:肝组织呈现不同程度的酒精性脂肪肝病理改变;(3)Crocin-T组部分肝组织形态结构基本正常,部分出现酒精性脂肪肝病理改变(病理改变程度不及Alco-M组);4.免疫组化:(1)Blank组:肝细胞内未见棕黄色颗粒;(2)Alco-M组:可见肝细胞内有棕黄色颗粒,与Blank组及Crocin-T组相比较,其颜色深、范围广;(3)Crocin-T组:部分可见肝细胞内有棕黄色颗粒,与Blank组比较,差异显著;与Alco-M组比较,其颜色深度、范围不及Alco-M组。Alco-M组及Crocin-T组与Blank组比较,JNK1、c-Jun表达水平明显升高,差异显著(r<0.05)。Crocin-T组与Alco-M组比较JNK1、c-Jun表达水平降低,差异显著(r<0.05)。结论:1.酒精可致大鼠ALT、AST等肝功指标明显异常,肝组织发生酒精性脂肪肝病理改变;2.氧化应激MAPK/JNK/c-Jun通路参与了酒精性脂肪肝病理发展过程,且其通路中JNK1、c-Jun表达量越多,肝组织生化、病理学改变越显著;3.西红花苷能有效抑制氧化应激MAPK/JNK/c-Jun通路的激活,下调JNK1、c-Jun的selleck SCH727965表达,减轻酒精性脂肪肝大鼠肝脏的氧化应激损伤、脂肪病变程度。