目的:Antidepressant medication舌鳞状细胞癌(Tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是极具侵袭性的口腔鳞状细胞癌之一。TSCC易发生淋巴结转移,容易对化疗药物产生耐药性,预后较差。因此,有必要制定有效的治疗策略来提高患者的生存率。褪黑素(Melatonin,MT)是一种天然的吲哚类化合物,已被证明在各种癌症中具有抑制肿瘤进展的作用。本研究的目的是研究MT对TSCC的作用和机制。方法:1.CCK-8法分析MT对舌鳞癌细胞的作用;Western blot法分析Cyclin B1和p21的表达是否发生改变;定量PCR(q PCR)法分析p21是否在m RNA水平发生改变。2.用MT处理舌鳞癌细胞24 h后,采用Transwell实验和伤口愈合实验分析MT对细胞迁移能力的影响;Western blot法检测Zeb1、Wnt5A/B、β-catenin、c-myc、p-c-myc和E-cadherin蛋白的表达水平,在蛋白水平分析MT对舌鳞癌细胞的影响。3.使用MT处理舌鳞癌细胞24 h后,采用Annexin-FITC/PI染色和流式细胞术分析细胞凋亡水平;定量PCR(q PCR)法检测HRK、TNFRSF10A和TNFRSF10B的m RNA水平;Western blot法检测BAX、Bcl-2蛋白的表达水平,分析MT对舌鳞癌细胞凋亡的影响。4.使用雷帕霉素处理舌鳞癌细胞,Western blot分析LC3、Beclin1、BAP31、Bip蛋白的表达水平,分析雷帕霉素对舌鳞癌细胞的影响。5.使用MT处理舌鳞癌细胞24 h,定量PCR(q PCR)法检测LC3的m RNA水平;Western blot法检测LC3、P62、Beclin1蛋白的表达水平,分析MT对舌鳞癌细胞自噬的影响。6.使用MT处理舌鳞癌细胞24 h,定量PCR(q PCR)法检测ATF4、ATF6、BIP、CHOP的m RNA水平;Western blot法检测BAP31、BIP、CHOP和IRE1α蛋白的表达水平,分析MT是否诱导舌鳞癌细胞发生内质网应激。7.使用生物信息学技术分析与细胞增殖、转移、凋亡、自噬和耐药性相关的Lnc RNA在头颈部肿瘤中的表达情况,包括Lnc RNA MALAT1、Lnc RNA H19、Lnc RNA TUG1、Lnc RNA PTTG3P、Lnc RNA DICER1-AS1和Lnc RNA GAS5。使用MT处理舌鳞癌细胞24 h,定量PCR(q PCR)法检测这些Lnc RNAs的表S63845试剂达水平。8.将正常CRL-1623细胞系注射至裸鼠腋窝的皮下,构建裸鼠异位移植瘤模型,腹腔注射PBS和MT,在体内分析MT对舌鳞癌的作用。结果:在本研究中,我们发现MT可以抑制TSCC细胞的增殖。Western blot的结果显示,MT可以抑制Cyclin B1蛋白并促进p21蛋白的表达。同时,MT可以降低Wnt5A/B、Zeb1和β-catenin的表达,增加E-cadherin蛋白的表达,从而抑制TSCC细胞的迁移能力。此外,我们的结果表明,MT可以增加LC3、Beclin1和Bax蛋白的表达,降低p62蛋白的表达。这提示MT可以诱导TSCC细胞发生自噬Mirdametinib研究购买和凋亡。为进一步探索MT的作用,我们筛选了几种与细胞增殖、转移、凋亡、自噬和耐药性相关的Lnc RNAs,并利用定量PCR(q PCR)分析了经MT处理后TSCC细胞中这些Lnc RNAs的表达水平。我们的结果表明Lnc RNA MALAT1和H19的表达下降,Lnc RNA DICER1-AS1和GAS5的表达上升。此外,在体外试验中,我们发现MT可以抑制接种CRL-1623的裸鼠的肿瘤生长。结论:这些结果表明,MT可以使舌鳞癌的生长能力降低,并诱导自噬和凋亡,这为治疗TSCC提供了一个潜在的天然化合物。