研究目的:新冠疫情突显了新发突发传染病防控的重要性。除了新冠病毒,猴痘也因2022年首次溢出非洲而GNE-140化学结构被世界卫生组织(WHO)发出最高级别的警告。与其他地区相比,非洲地区以刚果盆地-猴痘、西非-猴痘、埃博拉、马尔堡、裂谷热、拉沙热、黄热和天花病毒等为代表的致命性传染病,严重威胁人类健康。使用传统检测方法在偏远地区或者基层医院筛查和确认疑似患者受到了限制,亟需发展现场即时检测(POCT)的技术。环介导等温扩增(LAMP)技术因其操作简单、快速、无需热循环仪,在恒定温度条件下特异检测低至几拷贝的靶标核酸而广泛用于POCT领域。而微流控技术具有集成小型化、自动化和高通量等优点。因此,本研究拟结合LAMP与微流控芯片建立一体化检测技术平台,发展简单快速、灵敏、准确的多通道POCT检测技术,为非洲地区猴痘等传染病的现场快速检测提供技术支持。研究方法:本研究Taxus media基于十通道微流控芯片和便携式的荧光检测系统,开发了用于埃博拉、马尔堡、裂谷热、拉沙热、黄热、刚果盆地-猴痘、西非-猴痘和天花病毒八种病原体同时检测的微流控LAMP方法。进行了灵敏度和特异性评价,并验证微流控芯片上相邻的通道上是否存在交叉污染现象;使用加假病毒或标准质粒的血清和皮肤拭子作为模拟临床样本评估所建立的微流控LAMP技术,同时和传统的q PCR结果对比。研究结果:所建立的微流控LAMP多通道检测方法在温度为65℃、时间为60min内,可实现8种病原的高灵敏检测,检测限(LOD)为10~2-10~4copies/m L,比传统q PCR技术更灵敏,特异性结果表明:八种病原之间没有交叉污染的现象。研究结论:本项研究开发的微流控LAMP多通道检测方法能够在60 min内对八种病原体进行特异检测,检测限优于传统q PCR技术;同时该技术具有试剂消耗量少、气溶胶污染可能性小的优势;在检测过程中,芯片上每个反应孔仅仅需要3μL模板核酸即可进行扩增反应。该设备具有小型化和集成化的特点,适合非洲等资源匮乏的偏INCB28060半抑制浓度远地区进行快速多种病原的现场检测,对新发突发性传染病进行及时筛查和防控具有重要的意义。