湘云鲫2号肠道干细胞标志物LGR6分子特征及其多克隆抗体制备

【目的】克隆湘云鲫2号肠道干细胞标志物LGR6，分析其分子特征并制备多克隆抗体，为后续研究LGR6的功能及揭示其在维持鱼NSC 119875价格类肠道黏膜稳态中的分子机制提供重要工具。【方法】利用PCR克隆湘云鲫2号LGR6的ORF序列(3nLGR6)，通过InterProScan、TMHMM Server 2.0、SignalP 5.0、SWISS-MODEL、MEGA 11及STRING等在线软件进行生物信息学分析，并利用原核表达系统制备和纯化3nLGR6重组蛋白，将其免疫小鼠以制备多克隆抗体；使用制备的https://www.selleck.cn/products/liraglutide.html多克隆抗体，通过免疫组织化学法分析3nLGR6在湘云鲫2号肠组织中的分布。【结果】3nLGR6的ORF全长2874 bp，编码957个氨基酸残基。TMHMM 2.0预测该蛋白有7次跨膜结构域；同源性比对和进化分析表明3nLGR6与其他硬骨鱼的同源性较高，且具有较近的亲缘关系。此外，使用原核表达系统表达和纯化了3nLGR6部分蛋白，并制备Noninvasive biomarker其多克隆抗体。免疫组化结果显示，该抗体可特异性识别湘云鲫2号肠道内源性3nLGR6。【结论】3nLGR6编码蛋白的结构和功能相对保守。利用制备的3nLGR6抗体可特异性识别湘云鲫2号肠组织LGR6，为后续深入研究3nLGR6的功能提供了重要数据。