运输应激常导致动物机体遭受氧化应激,损伤肠道结构、降低肠道消化功能,进而影响畜禽生产性能,给养殖业带来经济损失。巴尔吡尔作为碱性离子型复合饲料添加剂,在改善养殖动物代谢、提高生产性能等方面有显著的作用。但目前有关于巴尔吡尔对运输应激动物肠道消化功能相关的作用效果研究并不完善。故本试验探究巴尔吡尔对运输应激大鼠生长性能、饲粮表观消化率、肠道消化酶和肠道菌群多样性的影响,为巴尔吡尔在防治畜禽运输应激的应用上做进一步推广。本试验共设五个时间点,分别为运输前三天(D-3)、运输上车前(D0)、运输到场后(D0+)、运输后第三天(D3)、运输后第十天(D10)。采用240只25日龄雄性SD大鼠,随机分为6组:空白对照组(Ⅰ,60只,检测时间点为D-3、D0、D0+、D3、D10),运输应激组(Ⅱ,36只,检测时间点为D0+、D3、D10),巴尔吡尔运前添加组(Ⅲ,48只,检测时间点为D0、D0+、D3、D10),维生素C运前添加组(Ⅳ,48只,检测时间点同Ⅲ组),巴尔吡尔运后添加组(Ⅴ,24只,检测时间点为D3、D10),维生素C运后添加组(Ⅵ,24只,检测时间点同Ⅴ组)。Ⅰ组大鼠不做运输处理,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组大鼠在运输当天(D0+)进行3.5 h的运输应激处理(公路运输,平均车速34km/h,全程116km,当日气温16℃,阴)。每个时间点不同试验组分别随机选12只大鼠采样。进行如下试验:1.巴尔吡尔对运输应激大鼠肠道消化功能的影响记录大鼠采食、体重以测定大鼠生长性能;收集大鼠新鲜粪便,通过凯氏定氮法、索氏Trichostatin A抽提法、范氏洗涤法分别检测粗蛋白、粗脂肪、粗寻找更多纤维饲料表观消化率指标;采集大鼠回肠内容物使用酶活性试剂盒检测肠道胰蛋白酶活性、脂肪酶活性、淀粉酶活性等指标。结果如下:(1)生长性能测定结果表明:在D-3～D0,运输前添加巴尔吡尔可显著提高大鼠采食量,维生素C效果不显著;在D0+,大鼠运输减重明显,运输前使用维生素C可显著降低大鼠运输减重;在D0+到D10的各阶段,运输应激一定程度降低了大鼠生长性能,运前添加维生素C或巴尔吡尔能一定程度提高运输应激大鼠生长性能,而运输后持续使用巴尔吡尔对运输应激大鼠生长性能的改善有较好的效果。(2)表观消化率测定结果表明:在D0+,运输应激组大鼠饲粮的的表观消化率显著低于空白对照组,在D3、D10仍未恢复正常水平;和运输应激组对比,运输后持续使用巴尔吡尔,可以显著提高大鼠在D3、D10的饲粮表观消化率,运输后持续使用维生素C,可提高大鼠在D10的表观消化率,而运输前使用virologic suppression巴尔吡尔或维生素C对其效果不显著。(3)消化酶活性测定结果表明:在D0,运输前添加巴尔吡尔或维生素C在三天内对大鼠肠道消化酶活性影响不大;在D0+、D3、D10,运输应激大鼠肠道脂肪酶活性显著低于空白对照组,且胰蛋白酶、淀粉酶活性也有降低趋势;运前添加巴尔吡尔,可提高D0+、D3、D10的大鼠肠道脂肪酶活性;运输后持续使用巴尔吡尔或维生素C,可提高D3、D10运输应激大鼠脂肪酶活性至正常水平。2.巴尔吡尔对运输应激大鼠肠道菌群的影响各组大鼠在不同时间点处死后无菌采集结肠内容物,通过16S r DNA扩增子高通量测序,探究巴尔吡尔对运输应激大鼠肠道菌群的影响。结果如下:(1)Alpha多样性分析结果表明:在D0,运前使用三天维生素C,显著降低大鼠肠道菌群丰度、减少物种数和降低群落多样性,而运前添加巴尔吡尔,对正常大鼠的肠道菌群影响不明显;在D0+,运输应激大鼠肠道菌群Alpha多样性指数无显著变化;在D3,运输应激会导致大鼠肠道菌群的物种数显著增多,运输后连续使用三天巴尔吡尔可显著降低运输应激大鼠肠道菌群物种数;在D10,运输应激大鼠肠道菌群Alpha多样性恢复至正常水平。(2)物种差异性T-test分析结果表明:在D0,运前添加维生素C,导致部分代谢功能相关菌和部分条件致病菌的相对丰度降低;在D0+,运输应激一定程度降低了大鼠肠道益生菌的相对丰度,增加了部分条件致病菌的相对丰度,运前添加巴尔吡尔可以提高部分益生菌相对丰度;在D3,运输应激导致大鼠肠道部分营养代谢相关细菌的相对丰度降低,而一些炎症相关菌、致病菌或条件致病菌相对丰度上升,运输后使用三天巴尔吡尔,运输应激大鼠肠道菌群中部分条件致病菌和炎症相关细菌的相对丰度显著降低;在D10,运前添加巴尔吡尔可提高运输应激大鼠肠道中部分有益菌相对丰度。(3)功能预测Tax4Fun分析结果表明:在D0,运前添加维生素C,导致大鼠肠道菌群遗传信息处理功能丰度上升、部分代谢相关功能丰度降低;在D0+,运输应激大鼠肠道菌群遗传信息处理功能丰度降低,部分代谢相关功能丰度增加,运前添加巴尔吡尔可促进运后大鼠肠道菌群结构优化;在D3,大鼠肠道菌群环境适应调节能力降低,而运后持续使用巴尔吡尔可显著增强大鼠肠道菌群的环境适应能力;而在D10,运输应激大鼠肠道菌群的功能相对丰度已与正常大鼠差异不显著。综上所述,运输应激导致大鼠生长性能、饲粮表观消化率、肠道消化酶活性降低,肠道有害菌丰度上升、益生菌丰度降低;运前或运后使用巴尔吡尔都可一定程度提高运输应激大鼠生长性能和饲粮表观消化率、提高肠道消化酶活性和提高菌群益生菌相对丰度、降低有害菌相对丰度;运后添加巴尔吡尔的效果在一定程度上优于运前添加巴尔吡尔。