基于网络药理学预测石榴皮抗甲型流感机制及初步药效学验证

目的:基于网络药理学预测石榴皮抗甲型流感的潜在有效靶点及作用机制,并通过动物实验进行验证。方法:通过TCMSP技术平台检索石榴皮的有效成分,筛选其作用的靶标。甲型流感的靶标通过TTD、DRUGBANK等数据库筛选。利用Cgut micro-biotaytoscape绘制石榴皮抗甲型流感网络图,通过STRING数据库构建蛋白互作网络,并对关键靶标的生物功能进行注释与通路分析。甲型流感病毒感染小鼠,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质印迹法(Western blot)检测白细胞介素17(interleukin 17, IL-17)通路中关键蛋白、炎症因子的表达,观测小鼠体质量、肺指数变化。结果:石榴皮中有7个潜在有效成分抗流感病毒、96个有效靶点,其中RELA、MAPK1、JUN、HIF1A、ESR1、NFKBIA、TP53可能为核心靶点,其作用机制可能与IL-17信号通路、化学致癌-受体激活、磷脂酰肌醇3-激酶等通路有关。初步的动物实验显示,石榴皮提取物参与调控IL-17通路,抑制炎症因子白细胞介素6(interleukin 6, IL-6)、肿瘤坏死因子-αselleckchem LY294002(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β, IL-1β)、TRAF6(TNF receptor associated factor 6)及核因子κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)p65蛋白表达(P<0.05)。结论:通过PF-07321332小鼠预测得出石榴皮中所含的6个成分与不同靶点、通路交互作用,抑制多个炎症因子相关蛋白的表达,进而防治甲型流感。