妊娠后,蜕膜化的子宫内膜(蜕膜)和滋养细胞共同构成了母胎界面,此时,作为天然免疫系统成员的自然杀伤(Natural killer,NK)细胞大量富集于母胎界面的蜕膜组织中。蜕膜NK细genetic mutation胞(Decidual natural killer cells,dNK)在母胎免疫耐受及胚胎发育中发挥重要作用。研究发现,dNK与人外周血循环NK细胞(Peripheral blood NK cells,pNK)的免疫学特性相差甚远,但机制不清。本课题中,我们分选并纯化正常人早孕dNK及外周血pNK细胞,采用代谢组学和蛋白质组学技术全面分析两组细胞间的代谢谱和蛋白表达谱差异,进一步揭示dNK免疫学特征。代谢组学分析发现,77种代谢物在dNK细胞中发生了明显的变化。值得注意的是,与pNK细胞相比,参与甘油磷脂和谷胱甘肽代谢的代谢物在dNK细胞中明显减少。甘油磷脂,包括24种差异代谢物,是dNK细胞中变化最丰富的一类代谢物。磷脂酰胆碱(PC)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、磷脂酰乙醇胺(PE)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)在dNK细胞中明显减少。蛋白质组学分析发现,394个蛋白质在dNK细胞中的表LGK-974研究购买达存在差异。在对差异蛋白质进行GO富集分析时发现,大量差异表达蛋白质主要富集在“NK细胞介导的细胞毒性”、“内质网的蛋白质加工”、“氧化还原酶活性”和“脂肪酸代谢”等通路中。我们也发现一些差异表达蛋白与细胞骨架重排相关,这似乎与dNK细胞毒性降低和细胞因子分泌增加有关。在dNK细胞上调最显著的BMS-907351研究购买“内质网的蛋白质加工”通路中,我们找到了通路中变化最为显著的差异蛋白CKAP4,并对其进行了体内外实验验证,发现在应激状态下CKAP4的缺失导致NK细胞分泌细胞因子能力降低。最后,通过蛋白质组学和代谢组学的整合分析发现,甘油磷脂的代谢下调抑制NK细胞的细胞毒性。此外,联合分析显示,dNK细胞内的氧化还原的失衡与差异代谢物的变化之间为正相关的关系。与pNK细胞相比,dNK细胞中谷胱甘肽代谢显著下调,ROS水平的增加导致细胞内氧化还原失衡。总的来说,本课题研究提供了人类dNK和pNK细胞的蛋白质组学和代谢组学分析数据。我们的数据表明,人类dNK细胞具有独特的代谢和蛋白表达特征,这将为进一步揭示dNK细胞区域免疫学特性的调控机制奠定理论基础,对全面理解妊娠免疫耐受的发生机制有着重要的意义,也为NK细胞的临床免疫治疗奠定理论基础和提供新的线索。